Гидролизат сыворотки: Что такое сывороточный гидролизат? — Полезные статьи от Atletmarket.

Полезные свойства гидролизата сывороточного протеина

Большинство атлетов знают, что сывороточный протеин весьма эффективен для наращивания мышечной массы, но чем именно полезен его гидролизат?

Если бы количество слогов в названии пищевой добавки было прямо пропорционально количеству дополнительно набранных килограммов мышечной массы, гидролизат сывороточного протеина положил бы любое спортивное питание на обе лопатки. Но давайте разберемся, предоставляет ли в действительности добавление «гидролизат» какие-либо весомые преимущества обычному сывороточныму протеину, или же его выдающиеся свойства – не более чем плод фантазии неопытных атлетов, которые своими советами попросту заставляют вас пускать на ветер лишних пару долларов в месяц?

В этой статье мы расскажем о том, что на самом деле представляет собой гидролизат сывороточного протеина, одна из самых спорных и широко обсуждаемых добавок в современном фитнес-сообществе.

Что собой представляет гидролизат сывороточного протеина

Молоко состоит из двух основных типов белка: казеина и сыворотки.

В период ранней лактации сывороточный белок в грудном молоке составляет примерно 90% от общего содержания белка, а затем соотношение сыворотки к казеину выравнивается примерно до 60:40 и 50:50 в фазе зрелой и поздней лактации соответственно. Для сравнения, в коровьем молоке содержится только 20% сыворотки, остальные 80% приходятся на казеин.

Высокое содержание сывороточного белка в грудном молоке указывает на его важную роль в стимулировании быстрого развития и укреплении  иммунной системы, а обилие казеина в коровьем молоке, по всей видимости, объясняет частые аллергические реакции, связанные с потреблением молочных продуктов.

После того как коровье молоко проходит процесс пастеризации и подвергается дополнительной обработке, сыворотка и казеин могут быть разделены несколькими способами. Сладкая сыворотка, в состав которой входит лишь 30-40% белка, является основной формой пищевой сыворотки. Остальные 60-70% сладкой сыворотки преимущественно представлены лактозой и жирами. Фильтрация и другие процессы очищения сыворотки нацелены на обеспечение более высокой концентрации белка и сокращение в ней количества углеводов и жиров. Конечный продукт называют концентратом сывороточного белка. Сывороточный протеин, содержащий более  90% сыворотки в общем объеме белка, называют изолятом сывороточного протеина.

Независимо от содержания концентрата или изолята, все эти формы сыворотки состоят из очень сложных пептидных структур. Чтобы уменьшить их размер, ферментам в пищеварительной системе необходимо последовательно разрушать пептидные связи между соединениями аминокислот с целью получения небольших конечных пептидов, которые сможет усваивать организм. Чтобы ускорить этот процесс, производители сывороточного протеина искусственно «предварительно переваривают » протеин, в результате чего и получается гидролизат сывороточного протеина.

Гидролизат можно производить из сладкой сыворотки на любом этапе создания изолята. Ферменты и используемые условия реакции – а также количество доступных для расщепления пептидных связей – диктуют окончательный состав гидролизата. Чем выше степень гидролиза, тем меньшим становится количество аминокислот в пептидной молекуле… и тем более горьким вкусом отличается полученный протеин. Таким образом, свойства сывороточных гидролизатов варьируются в гораздо более широком диапазоне, чем свойства концентратов или изолятов.

Для кого подходит гидролизат сывороточного протеина

Гидролизат сывороточного протеина отлично подходит для атлетов, которые нуждаются в высококачественном источнике белка, способном помочь им в удовлетворении суточной потребности в белке и максимизации роста мышц. Кроме того, ввиду его значительного воздействия на уровень инсулина и степень сытости, гидролизат является отличным источником белка для пост-тренировочных добавок и увеличения мышечной массы при одновременном снижении запасов жира.

Как работает гидролизат

Сывороточный протеин идеально подходит для стимулирования роста мышц. Было доказано, что в ходе силовых тренировок он обеспечивает наибольший анаболический отклик. Кроме этого, сывороточный протеин стимулирует синтез мышечного белка на 122% и 31% больше, чем казеин или соя соответственно.

Сывороточный протеин содержит на 30-50% больше аминокислоты лейцина, важнейшей  аминокислоты с разветвленной боковой цепью, отвечающей за стимулирование синтеза мышечного белка. Он «биодоступен» и быстро усваивается, повышая уровни аминокислот в крови сразу после потребления. Чем быстрее растет содержание в крови аминокислот, тем выше пик и суммарный отклик синтеза протеина.

Кроме того, было продемонстрировано, что сывороточный протеин улучшает восстановление после тренировок и укрепляет иммунную функцию, а также увеличивает термогенез, содействует сжиганию жира и притупляет чувство голода. Так что сывороточный протеин не только отлично подходит для наращивания мышечной массы – это также мощное средство в борьбе с лишним жиром! Гидролизат сывороточного протеина еще больше увеличивает позитивный эффект сывороточного протеина из-за его способности быстрее повышать уровни аминокислот в плазме и обеспечивать их большую  концентрацию. И хотя немногочисленные исследования на людях пока еще не представляют собой статистически значимую выборку, повышение содержания аминокислот в крови после потребления гидролизата по сравнению с обычным сывороточным протеином выглядит весьма многообещающе.

Пока все звучит впечатляюще… но есть ли недостатки?

Парадоксально, но хотя резкое повышение уровня аминокислот в крови при потреблении гидролизата эффективно стимулирует синтез белка, это также увеличивает окисление аминокислот – то есть, разрушение аминокислот для использования их в качестве источника энергии.

Некоторые люди считают, что подобное увеличение степени окисления равноценно нерациональному расходу аминокислот, но это довольно упрощенное представление о белковом обмене. Только лишь то, что аминокислоты используются в качестве источника энергии, а не восполняют резервы организма, не означает, что они расходуются «впустую». Гидролизат сывороточного протеина по-прежнему является гораздо более анаболическим протеином по сравнению с другими источниками белка, которые не вызывают такого значительного увеличения окисления аминокислот.

Другой потенциальный «недостаток» – то, что гидролизат сывороточного протеина, как правило, стоит значительно дороже, чем обычный сывороточный протеин. Чем выше степень гидролизата, тем больше цена. Но как потребитель вы, естественно, должны соизмерять повышение стоимости с потенциальной выгодой.

В какой дозировке необходимо принимать гидролизат сывороточного протеина 

Это зависит от вашего веса тела, общего потребления белка и от того, будете ли вы потреблять гидролизат в одиночку или вместе с другими источниками белка. Поскольку гидролизат сывороточного протеина  богат лейцином, вам нет необходимости принимать его в таком же большом количестве, как если бы вы стремились максимизировать мышечный рост, используя другие источники белка. Например, 90-килограммовому атлету, стремящемуся увеличить мышечную массу, рекомендуется принимать 25-35 граммов гидролизата сывороточного протеина сразу после тренировки или вместо привычной протеиновой добавки. Для сравнения, для достижения аналогичного эффекта без спортивных добавок потребуется принимать в пищу 45 граммов куриной грудки.

Когда необходимо принимать гидролизат сывороточного протеина 

Употреблять эту добавку можно в любое время суток, но большинство атлетов принимают гидролизат сывороточного протеина  до и после тренировки.

Потребление сывороточного протеина перед тренировкой гарантирует, что во время занятий в кровь будет поступать достаточное количество аминокислот. Вредно ли это для вашего желудка? Маловероятно. Гидролизат сывороточного протеина легко усваивается и не нарушает пищеварения.

Прием после тренировки содействует восстановлению путем максимизации анаболического отклика и увеличения синтеза белка. Исследования показывают, что гидролизат сывороточного протеина  усиливает реакцию роста мышц на силовые тренировки, уменьшает жировые отложения, сокращает время восстановления и снижает болезненность мышц.

Как выбрать правильную добавку

Рекомендуется выбирать добавки, которые содержат сывороточный протеин со степенью гидролиза не менее 15%. Например, в ходе исследований центра «4Life Research» (Юта, США) использовался 32%-ый гидролизат, полученный из 80%-концентрата сывороточного белка; однако, при более высокой степени гидролиза протеин становился на вкус неприятно горьким. Если вам нужен продукт с невысоким содержанием жиров и углеводов, выберите гидролизат, полученный из изолята или 80%-го концентрата сывороточного протеина. Усиленное расщепление пептидных связей наблюдается при высокой степени гидролиза (20-32%).

Есть ли у гидролизата скрытые побочные эффекты?

Хотя у некоторых людей наблюдается аллергия на сывороточный протеин, в случае последнего аллергические реакции не столь распространены, как, например, при приеме казеина, сои или пшеничного протеина. В действительности, было доказано, что даже у атлетов, зачастую страдающих от расстройств желудка, болей в животе, диареи, тошноты и других заболеваний желудочно-кишечного тракта, возникающих в результате аллергии на молочные продукты, не наблюдалось проявления каких-либо существенных побочных эффектов при потреблении  гидролизата сыворотки с высокой степенью гидролиза, состоящего преимущественно из пептидов с низким молекулярным весом.

Вывод

Гидролизат сывороточного протеина является источником высококачественного белка и обладает массой полезных эффектов как для улучшения физических показателей, так и для общего здоровья вашего организма.

Гидролизат сывороточного протеина: оценка эксперта

Большинству из вас известно, что сывороточный протеин – отличный инструмент для набора мышечной массы, но все ли вы знаете о гидролизате сывороточного протеина?

Автор: Крис Локвуд, доктор наук

Если бы количество деталей препарата было прямо пропорционально набранным килограммам мышечной массы, гидролизат стал бы абсолютным чемпионом в категории пищевых добавок. Но вот в чем вопрос: действительно ли довесок «гидролизат» к фразе «сывороточный протеин» что-то значит, или это всего лишь грамотный ход маркетологов, призванный каждый месяц заставлять вас выкладывать чуть большую сумму денег?

Хороший вопрос. У меня есть ответы и кое-что еще. Сегодняшний урок посвящен сывороточному гидролизату, популярнейшему продукту мира бодибилдинга.

Что такое гидролизат сывороточного протеина?

В молоке содержатся два типа белковых молекул: сыворотка и казеин. В грудном молоке на долю сывороточного протеина приходится около 90% в периоде ранней лактации, а затем содержание белковых фракций постепенно выравнивается до 60:40 и 50:50 в фазе зрелой и поздней лактации, соответственно. Сравните эти показатели с коровьим молоком, которое содержит лишь 20% сывороточной фракции, а оставшиеся 80% приходятся на казеин.

Высокое содержание сывороточного протеина в грудном молоке красноречиво свидетельствует о его важной роли в быстром развитии сильной иммунной системы, в то время как обилие казеина в коровьем молоке объясняет большую частоту аллергических реакций, связанных с употреблением молочных продуктов.

После пастеризации и переработки коровьего молока сывороточный протеин и казеин могут быть разделены несколькими способами. Сладкая сыворотка, которая является основной формой пищевой сыворотки, лишь на 30-40% состоит из белка, а оставшиеся 60-70% представлены преимущественно лактозой и жирами. Фильтрация и другие методы очистки концентрируют сыворотку, снижая долю жиров и углеводов и увеличивая содержание протеиновых молекул. Полученный продукт называется концентратом сывороточного протеина, а если доля белка в сыворотке возрастает до 90% и более, мы говорим об изоляте сывороточного протеина.

Независимо от содержания концентрата или изолята, все формы сывороточного протеина все еще состоят из очень больших пептидных структур. Чтобы уменьшить размер макромолекул, ферменты пищеварительного тракта должны разрушить пептидные связи между аминокислотами и извлечь из них небольшие пептиды, которые наш организм может усваивать. Для ускорения этого процесса производители сыворотки «предварительно переваривают» протеин, в результате чего получается гидролизат сывороточного протеина.

Гидролизат может быть получен из сладкой сыворотки на любом этапе создания изолята. Следует заметить, что используемые для этого ферменты и условия реакции, а также количество имеющихся пептидных связей, которые будут расщеплены, определяют состав конечного гидролизата. Чем выше степень гидролиза, тем меньше количество аминокислот в пептидной молекуле, и тем сильнее выражен горький вкус готового протеина. По этой причине (степень гидролиза) характеристики гидролизата могут варьировать в значительно большем диапазоне, чем свойства концентрата и изолята.

Кому пригодится сывороточный гидролизат?

Сывороточный гидролизат прекрасно подойдет каждому, кто ищет источник высококачественного белка, который поможет получить суточную норму протеина и максимизировать мышечный рост. Вдобавок, по причине значительного влияния на секрецию инсулина и центры насыщения, гидролизат является отличным источником белка для посттренировочных комплексов и программ питания, нацеленных на рост мышечной массы при одновременном снижении доли жировой ткани.

Как работает гидролизат?

Сывороточный протеин – идеальный продукт для набора мышечной массы. Ученые доказали, что сыворотка стимулирует колоссальный анаболический отклик на силовой тренинг: в ответ на физическую нагрузку сывороточный белок увеличивает синтез мышечного протеина на 122% и 31% больше, чем казеин и соя, соответственно.

Сыворотка содержит на 30-50% больше лейцина – незаменимой аминокислоты с разветвленными цепями, отвечающей за активацию синтеза мышечного протеина. Она «биологически доступна», быстро усваивается и сразу после приема увеличивает содержание аминокислот в крови. А чем быстрее растет концентрация в кровотоке аминокислот, тем сильнее разгоняется синтез мышечного протеина. В этом отношении сыворотка является лучшим протеиновым продуктом с точки зрения цена/качество.

Исследования показали, что сывороточный протеин ускоряет восстановление после физической нагрузки и укрепляет иммунную систему, а также стимулирует термогенез, способствует расщеплению жиров и уменьшает чувство голода. Следовательно, сыворотка – это не только прекрасный инструмент для набора мышечной массы, но еще и мощнейшее топливо для сжигания жиров!

Гидролизат многократно усиливает полезные свойства сывороточного протеина, перечисленные выше, поскольку обладает способностью быстрее повышать уровень аминокислот в крови и дает больший подъем их концентрации, чем обычная сыворотка. И хотя исследований на людях не так много, чтобы считать эти различия статистически достоверными, более выраженный аминокислотный ответ на гидролизат по сравнению с сывороткой кажется очень многообещающим. В своей диссертации я доказал, что люди, принимавшие 30 грамм гидролизата 2 раза в день, добились заметного роста мышечной массы при снижении доли жиров без значительного влияния на общую массу тела.

Пока звучит здорово, но что насчет недостатков?

Парадоксально, но стремительный рост концентрации аминокислот в крови, вызываемый гидролизатом, не только стимулирует синтез мышечного протеина, но и усиливает окисление аминокислот – распад аминокислотных молекул с выделением энергии.

Некоторые люди считают, что активация окислительных процессов – пустая трата аминокислот, но это слишком упрощенный взгляд на белковый обмен. Тот факт, что аминокислоты не восполняют резервы, а идут на нужды энергетического обмена, вовсе не означает, что они расходуются «впустую». Гидролизат все равно остается самым мощным анаболическим протеином в сравнении с другими источниками белка, не вызывающими столь значительного увеличения темпов окисления аминокислот.

Еще один гипотетический недостаток – если вам угодно так это называть – цена сывороточного гидролизата, которая заметно превышает стоимость обычного сывороточного протеина. И чем выше степень гидролиза, тем выше будет цена. Но, послушайте, вы ведь получаете как раз то, за что платите, и как потребитель, вы должны понимать, какие перспективы открывает перед вами это повышение себестоимости продукта.

Гидролизат сывороточного протеина можно принимать в любое время суток

Сколько гидролизата сывороточного протеина мне следует принимать?

Это зависит от вашей массы тела, общего потребления протеина, а также от того, принимаете ли вы другие протеины, кроме гидролизата. Поскольку гидролизат сывороточного протеина богат лейцином, для максимальной стимуляции мышечного роста его вам понадобится меньше, чем других источников белка. Например, 90-кг мужчине, который хочет форсировать мышечный рост, я бы рекомендовал принять 25-35 грамм сывороточного гидролизата сразу после тренировки или вместо обычного протеинового коктейля.

Когда я должен его принимать?

Гидролизат сывороточного протеина можно принимать в любое время суток, но многие люди предпочитают пить его до и после тренировки. Прием сывороточного гидролизата перед тренировкой гарантирует, что на протяжении всей тренировочной сессии в крови будет присутствовать достаточный запас аминокислот. Может ли гидролизат спровоцировать расстройство желудка? Это вряд ли. Гидролизат сывороточного протеина – легкоусвояемый продукт, дружественный по отношению к пищеварительной системе.

Прием гидролизата сывороточного протеина после тренировки даст мощный импульс восстановлению за счет максимального анаболического ответа на физическую нагрузку и резкого усиления синтеза мышечного протеина. Исследования показали, что сывороточный гидролизат может многократно усилить рост мышц в ответ на силовой тренинг, снизить процент жира в организме, ускорить восстановление и уменьшить болезненность мышц.

Сывороточный гидролизат может многократно усилить рост мышц в ответ на силовой тренинг

Как выбрать качественный продукт?

Рекомендую искать продукт, который содержит сильно гидролизованный сывороточный протеин со степенью гидролиза не ниже 15%. В своем исследовании я использовал 32% гидролизат, полученный из 80% сывороточного концентрата, и это тот максимум, выше которого вы и сами не захотите подниматься, потому что горечь продукта становится действительно отталкивающей. Если вам нужен продукт с минимальным содержанием жиров и углеводов, ищите гидролизат, полученный из изолята или 80% концентрата сывороточного протеина. Если главным критерием является размер пептидных молекул, выбирайте высокую степень гидролиза (20-32%).

Стоит ли опасаться скрытых побочных эффектов?

У некоторых людей сыворотка может спровоцировать аллергические реакции, но риск несопоставимо ниже в сравнении с казеином, соевым или пшеничным белком. На самом деле, даже люди, которые в иных случаях испытывают дискомфорт и боль в желудке, диарею, рвоту и другие симптомы расстройства пищеварения, связанные с пищевой аллергией, крайне редко сталкиваются с побочным действием сывороточного гидролизата с высокой степенью гидролиза, состоящего преимущественно из низкомолекулярных пептидов.

Кому гидролизат противопоказан?

Если лечащий врач по медицинским причинам посоветовал вам воздержаться от приема продукта, вам не следует его принимать. Хотя большинство людей отлично переносят гидролизат сывороточного протеина, лицам с тяжелой аллергией на сыворотку действительно следует соблюдать осторожность.

Резюмируем вышесказанное

Гидролизат сывороточного протеина – первоклассный высококачественный источник белка, обладающий несметным числом полезных свойств, которые пригодятся как в бодибилдинге, так и для укрепления здоровья.

Гидролизованный сывороточный протеин, отличается высокой степенью очистки и быстрой скоростью усвоения.

Гидролизованный сывороточный протеин, обогащенный пищеварительными ферментами, бетаином и креатином.

Быстродействующий гидролизованный сывороточный протеин без лактозы, жиров и углеводов.

Читайте также

Характеристика биологически активных гидролизатов белков молочной сыворотки и молозива | Головач

1. Schaafsma, G. Safety of protein hydrolysates, fractions thereof and bioactive peptides in human nutrition / G. Schaafsma // Eur. J. Clin. Nutr. – 2009. – Vol. 63, N 10. – P. 1161–1168. https://doi.org/10.1038/ejcn.2009.56

2. Sánchez, A. Bioactive peptides: a review / A. Sánchez, A. Vázquez // J. Food Safety. – 2017. – Vol. 1, N 1. – P. 29–46. https://doi.org/10.1093/fqsafe/fyx006

3. Conte, F. A study on the quality of bovine colostrum: physical, chemical and safety assessment / F. Conte, S. Scarantino // Int. Food Res. J. – 2013. – Vol. 20, N 2. – P. 925–931.

4. El-Agamy, E. I. The challenge of cow milk protein allergy / E. I. El-Agamy // Small Rumin. Res. – 2007. – Vol. 68, N 1–2. – P. 64–72. https://doi.org/10.1016/j.smallrumres.2006.09.016

5. Wal, J.-M. Bovine milk allergenicity / J.-M. Wal // Ann. Allergy Asthma Immunol. – 2004. – Vol. 93, N 5. – P. S2–S11. https://doi.org/10.1016/s1081-1206(10)61726-7

6. Antioxidant capacity of cow milk, whey and deproteinized milk / A. Zulueta [et al.] // Int. Dairy J. – 2009. – Vol. 19, N 6–7. – P. 380–385. https://doi.org/10.1016/j.idairyj.2009.02.003

7. Effect of probiotics on antioxidant and antimutagenic activities of crude peptide extract from yogurt / B. N. P. Sah [et al.] // Food Chem. – 2014. – Vol. 156, N 1. – P. 264–270. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2014.01.105

8. Остерман, Л. А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование / Л. А. Остерман. – М. : Наука, 1981. – 288 с.

9. Тарун, Е. И. Сравнение антиоксидантных активностей галловой, кофейной и хлорогеновой кислот / Е. И. Тарун // Тр. БГУ. Физиологические, биохимические и молекулярные основы функционирования биосистем. – 2014. – Т. 9, ч. 1. – С. 186–191.

10. Дудчик, Н. В. Количественная оценка антимутагенной активности растительной композиции в краткосрочном тесте / Н. В. Дудчик // Здоровье и окружающая среда. – 2014. – Т. 1, № 24. – С. 218–221.

11. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц ; пер. с англ. Ю. А. Данилова ; под ред. Н. Е. Бузикашвили, Д. В. Самойлова. – М. : Практика, 1999. – 459 с.

12. Иммунологические методы / Х. Амброзиус [ и др.] ; под ред. Г. Фримеля ; пер. с нем. А. П. Тарасова. – М. : Медицина, 1987. – 472 с.

13. Halavach, T. M. Enzymatic hydrolysis of milk proteins as a basis of specialized food products biotechnology / T. M. Halavach, V. P. Kurchenko, A. I. Albulov // Nauka i Studia. – 2016. – Vol. 3. – P. 1196–1207.

14. Способ получения гидролизата белков молока (варианты): пат. 16161 Респ. Беларусь, МПК А 23 J 3/34, А 23 J 1/20, С 12 N 1/20 / Т. Н. Головач, Н. К. Жабанос, Н. Н. Фурик, В. П. Курченко; заявитель РУП «Институт мясо-молочной промышленности». – N а 20101723; заявл. 2010.11.30; опубл. 2012.08.30 // Афіцыйны бюл. / Нац. цэнтр інтэлектуал. уласнасці. – 2012. – N 4. – С. 58–59.

15. O’Keeffe, M. B. Antioxidant effects of enzymatic hydrolysates of whey protein concentrate on cultured human endothelial cells / M. B. O’Keeffe, R. J. FitzGerald // Int. Dairy J. – 2014. – Vol. 36, N 2. – P. 128–135. https://doi.org/10.1016/j.idairyj.2014.01.013

16. Reducing and radical-scavenging activities of whey protein hydrolysates prepared with Alcalase / X. Peng [et al.] // Int. Dairy J. – 2010. – Vol. 20, N 5. – P. 360–365. https://doi.org/10.1016/j.idairyj.2009.11.019

17. Identification of bioactive peptides after digestion of human milk and infant formula with pepsin and pancreatin / B. Hernández-Ledesma [et al.] // Int. Dairy J. – 2007. – Vol. 17, N 1. – P. 42–49. https://doi.org/10.1016/j.idairyj.2005.12.012

18. The dual effects of Maillard reaction and enzymatic hydrolysis on the antioxidant activity of milk proteins / N. S. Oh [et al.] // J. Dairy Sci. – 2013. – Vol. 96, N 8. – P. 4899–4911. https://doi.org/10.3168/jds.2013-6613

19. β-Casein hydrolysate generated by the cell envelope-associated proteinase of Lactobacillus delbrueckii ssp. lactis CRL 581 protects against trinitrobenzene sulfonic acid-induced colitis in mice / M. B. E. Turbay [et al.] // J. Dairy Sc. – 2012. – Vol. 95, N 3. – P. 1108–1118. https://doi.org/10.3168/jds.2011-4735

Сывороточный протеин и его степени очистки (концентрат, изолят, гидролизат)

Определение и производство

Сывороточный протеин, как спортивная добавка, это сочетание глобулярных белков, которые получают специфическим путём ферментации побочного продукта молочного производства – сыворотки.

Если выражаться проще, то сырьём для данного вида белковых добавок служит остаточный продукт сыроварения. С помощью определённых технологий жидкий раствор сыворотки, содержащий в себе все полезные вещества, пастеризуется и фильтруется до получения нужного процентного соотношения чистого белка.

После этого мы уже имеем исходное сырьё необходимого качества для производства белковой добавки. Добавив различные компоненты для придания вкуса и запаха, а так же нужной консистенции мы получаем концентрат сывороточного белка, который можем приобрести в любом магазине спортивного питания по всему миру. Но можно пойти ещё дальше…

Степени очистки протеина (фракции)

Концентрат

Как уже упоминалось выше, концентрат, это первая степень очистки любого белка. Пройдя пастеризацию, фильтрацию и концентрирование мы уже получаем чистый и готовый к употреблению продукт. Процентное соотношения белка на 100 г продукта в таких случаях может иметь очень широкий диапазон. Начиная от 40% и заканчивая 80%. Чаще всего используется Whey Protein Concentrate (WPC80). Цифра в конце означает процент непосредственно белка. Такой концентрат имеет очень мало отличий от изолята и его вы встретите практически в каждом продукте средней ценовой категории.

Изолят

Изолят – это следующий уровень очистки сыворотки. Такое название произошло из того факта, что во время производства данного протеина все не нужные вещества, как например лактоза, жиры и сахара, изолируются и остаётся исключительно чистый продукт. Сывороточный изолят могут принимать даже те, у кого наблюдается непереносимость лактозы или какие-либо аллергические реакции на молочную продукцию. Так же данная фракция белка имеет куда больше незаменимых аминокислот с разветвлёнными боковыми цепочками (ВСАА), а его усвоение проходит существенно быстрее.

Гидролизат

Гидролизат – это вершина процесса очистки сыворотки. Данная фракция сывороточного протеина является наиболее чистой и лишённой всяческих примесей. Здесь уже не будет ни грамма углеводов, лактозы или жира, а белок уже разложен до сочетаний из двух или трёх аминокислот. Такой протеин, принятый на пустой желудок, усваивается в течение 20-30 минут. Гидролизат можно считать полностью безопасным для аллергиков. Но в таких замечательных показаниях по всем направлениям кроется существенный минус, это стоимость такого продукта. Но вы должны понимать за что вы платите больше и оно того действительно стоит.

Гидролизат сывороточного протеина: в каких целях используют и какой лучше в 2021 году

Любой специалист в сфере спорта или опытный атлет скажет вам, что сывороточный протеин – это один из самых безобидных видов спортивного питания. Он выпускается в трех формах – концентрат, изолят и гидролизат. Именно последнюю разновидность, которая является наиболее очищенной и легко усвояемой, мы рассмотрим сегодня в нашей статье. Помимо подробной и очень полезной информации о гидролизате протеина, эксперты TehCovet.Ru подготовили для вас рейтинг лучших и проверенных торговых марок такого спортивного питания.

ОПРОС: Как по-вашему, протеин — этоPoll Options are limited because JavaScript is disabled in your browser.

• полезно 68%, 102 голоса

  102 голоса 68%

  102 голоса — 68% из всех голосов

• полезно только для спортсменов 25%, 38 голосов

  38 голосов 25%

  38 голосов — 25% из всех голосов

• вредно, но при занятии спортом можно употреблять 5%, 7 голосов

  7 голосов 5%

  7 голосов — 5% из всех голосов

• вредно, очередная химия 3%, 4 голоса

  4 голоса 3%

  4 голоса — 3% из всех голосов

Всего голосов: 151

Голосовало: 147

17.04.2021

×

Вы или с вашего IP уже голосовали.

Что такое гидролизат сывороточного протеина?

В основу гидролизованного протеина заложена молочная сыворотка, а начальные стадии приготовления практически ничем не отличаются от производства изолята. Особенность заключается только в финальной стадии, так как применяется одноименная к названию спортпита технология – гидролиз. Она подразумевает раздробление клеток и веществ, в данном случае – белка, при помощи воды.

Так, молекулы аминокислот разделяют на ди- и трипептиды, которые идентичны естественным ферментам нашего организма. Благодаря такому способу получается частично разрушенный белок.

Если говорить другими словами, такой протеин – это усовершенствованная форма изолята, так как он уже расщеплен на ферменты. Вот почему у гидролизата рекордная скорость усвояемости – всего 15-20 минут, если принимать коктейль на голодный желудок. Соответственно, для всасывания и переваривания такого белка организм затрачивает намного меньше энергии, но получает нужную порцию чистых и качественных аминокислот для роста мышц.

Чем гидролизат отличается от концентрата и изолята?

Сывороточный протеин представлен на рынке в трех формах – концентрат, изолят и гидролизат. Их функции схожи – это наращивание мышечной массы, но способ производства отличается. От этого зависит и содержание макронутриентов, степень очистки, скорость усвоения.

Из всех трех форм концентрат имеет меньшее количество белка. В процентном содержании оно достигает от 60% до 78%. Сахарозы в нем совсем немного, но молочный сахар, то есть, лактоза, присутствует. Поэтому людям с индивидуальной непереносимостью данного компонента принимать концентрат не рекомендуется.

В изоляте концентрация белка еще выше – от 78% до 90%, так как он лучше очищен. Сахар, если и присутствует, то совсем в минимальных количествах. Процесс усвоения протекает быстрее.

Гидролизат, как мы уже говорили, – это частично расщепленный белок. Такую сыворотку уже подвергали процессу денатурации, что делает его идентичным ферментам и пептидам, которые уже содержатся в человеческом организме. Данный протеин характеризуется самой высокой степенью очистки, а концентрация белка в нем достигает целых 95%. При этом жиры и углеводы практически отсутствуют.

Для чего нужен гидролизат?

Функция гидролизата, как и любого другого протеина, – это наращивание мышечной массы и донабор суточной нормы белка. Аминокислоты, которые входят в состав данного спортивного питания, имеют несколько полезных функций:

• улучшение и нормализация метаболизма;
• восстановление мышц после тренировки;
• наращивание и уплотнение мышечных волокон;
• улучшение состояния кожи, волос и ногтей;
• синтез инсулина в организме;
• выведение триглицеридов, то есть, холестерина.

Очень важно соблюдать суточную норму, рекомендуемую производителем, и придерживаться выбранной схемы приема. В противном случае избыток гидролизованного протеина в организме не оказывает дополнительного и более мощного эффекта, а просто перерабатывается в глюкозу.

Как принимать гидролизат?

Схема приема гидролизата отличается от употребления сывороточного концентрата и изолята. Особенность состоит в том, что он не используется как основной источник белка. Обычно в комплексе с гидролизатом спортсмены принимают аминокислоты с разветвленной цепочкой.

Если планируете все-таки попробовать использовать сывороточный гидролизат как основной источник белка, то отталкивайтесь от классического расчета, исходя из своей массы тела и процента подкожного жира, а также рекомендаций производителя. Помните, что не рекомендуется превышать 15 грамм сухого порошка такого протеина на одну порцию.

Вот еще несколько общих рекомендаций по употреблению гидролизованного протеина:

1. Делите его прием на три порции в день, если тренировка планируется, и на две порции, если не планируется.
2. Не забывайте пить такие протеиновые коктейли утром практически сразу после пробуждения, чтобы остановить процесс катаболизма, который протекает в организме в период отдыха и сна.
3. Рекомендуется пить гидролизат и перед сном, чтобы уменьшить негативное влияние катаболических процессов и обеспечить синтез белка в организме даже во время сна.
4. После тренировки коктейли на основе гидролизата помогают закрыть аминокислотное окно, пить лучше сразу после тренировки или через 10 минут.

Как уже говорилось выше, нужно выбрать соответствующую систему приема спортпита, которая зависит от наличия тренировки, и делится на две или три порции соответственно.

В нетренировочный день:

1. Утром на завтрак или через 30 минут после пробуждения и основного приема пищи.
2. Вечером перед ужином за 20-30 минут.

В тренировочный день:

1. Утром после завтрака через 20-30 минут.
2. Сразу же или через 10 минут после тренировки, для восполнения потраченных запасов белка.
3. Вечером перед ужином за 20-30 минут.

Читайте также: Самый лучший сывороточный протеин: ТОП-10 вкусного и эффективного

Польза и вред сывороточного гидролизата

Любое спортивное питание – это, в первую очередь, продукт, который подвергается химической обработке. Протеин, в том числе гидролизат – это ненатуральный продукт, поэтому он имеет не только полезные свойства, но и недостатки, а также побочные эффекты. Для удобства читателей мы сформировали соответствующую таблицу:

Польза	Вред
Очень быстро усваивается организмом, для полного расщепления нужно всего 20-30 минут	Не насыщает организм аминокислотами на длительный период
Моментально питает и защищает мышцы, что обеспечивает их быстрый рост	Может задерживать вывод жидкости из организма, в связи с чем появляется отечность
Дает анаболический эффект, так как повышает выработку инсулина в крови	Если в составе гидролизата есть креатин, то будет сложно добиться “сухих” и рельефных мышц
Нормализует выработку гормона кортизола и восполняет запасы гликогена

Критерии выбора гидролизованного протеина в магазине

1. Бренд. Продукция проверенных производителей редко бывает плохого качества. Но зачастую их спортивное питание стоит гораздо дороже, чем товары от отечественных или начинающих брендов. Если вы отталкиваетесь от ценовой политики, то не забудьте обязательно изучить состав и качество ингредиентов, а подлинность продукции можно проверить на специальном сайте по штрих-коду. Так, вероятность купить подделку или некачественный протеин совсем минимальна.
2. Состав. Наличие дополнительных полезных компонентов никогда не бывает лишним. Например, аминокислотный комплекс или витамины – прекрасные добавки для гидролизованного протеина. К тому же они усиливают анаболический эффект и оказывают благоприятное воздействие на организм.
3. Содержание белка. Сывороточный гидролизат – это спортивное питание с максимально высокой концентрацией белка. Его должно быть гораздо больше, чем в изоляте и концентрате. В среднем показатель должен быть около 95%.
4. Происхождение белка. Молоко – основной продукт для приготовления такого протеина. А если быть точнее, то главный компонент – это сыворотка, которую получают путем процеживания молока. Очень важно проверить протеин на отсутствие посторонних видов белка, в том числе пшеничного и соевого. Их используют для снижения себестоимости производства, а гидролизат не должен быть белковой смесью. Этот протеин должен быть отличного качества и высокой степени очистки.
5. Органолептика. Так как гидролизат является уже частично расщепленным белком, то коктейли на его основе должны хорошо и быстро растворяться, без образования комков и липких сгустков. Для проверки качества попробуйте небольшое количество именно сухого порошка. Он должен прилипать к зубам и деснам.

Сводная таблица гидролизата

Гидролизат	Недостатки	Вкусы	Питательных веществ в 1 порции	Найти в магазине
“Optimum Nutrition” Platinum Hydro Whey	маленький ассортимент вкусов	ваниль, шоколад	белки: 30 г, жиры: 1 г, углеводы: 2 г	Yandex.Market
“BIOTECH” HYDRO WHEY ZERO	маленький ассортимент вкусов	ваниль, клубника, шоколад	белки: 23 г, жиры: 0.10 г, углеводы: 0.10 г	Yandex.Market
“QNT” Delicious Whey Protein	протеиновая смесь	банан, ваниль, клубника, печенье, сливки, шоколад	белки: 46 г, жиры: 3.40 г, углеводы: 5.30 г	Yandex.Market
“My Protein” Hydrolyzed Whey Protein	только один нейтральный вкус	нейтральный	белки: 24 г, жиры: 1.40 г, углеводы: 1 г	Yandex.Market
“Prodiet” Hydroliysate S25	только один нейтральный вкус	нейтральный	белки: 17,5 г, жиры: 0,23 г, углеводы: 2,3 г	Yandex
“HYDRO” AMINO+	высокая цена	нейтральный	белки: 9 г, жиры: 0,7 г, углеводы: 0,3 г (в суточной дозе)	Yandex.Market
“SPONSER” Premium Whey Hydro	только один вкус	ваниль	жиры: 0.8 г, углеводы: 0.8 г	Yandex.Market

ТОП-7 лучших марок гидролизованного протеина в 2021 году

“Optimum Nutrition” Platinum Hydro Whey – лидер на рынке

Один из лучших гидролизатов на рынке спортивного питания. И это неудивительно, потому что продукция “Optimum Nutrition” – эталон качества. Коктейли на его основе помогают не только набрать массу, но и восстановить мышцы после интенсивной тренировки.

Основа продукции – чистый гидролизованный изолят сывороточного белка. В состав также входит комплекс измельченных аминокислот ВСАА с разветвленными цепями. Они усиливают действие протеина.

В одной порции содержится до 30 граммов чистейшего белка, из которых 9 грамм приходится на лейцин, изолейцин и валин.
Коктейль готовится очень просто, ведь он легко растворяется до однородной консистенции даже с помощью обычной ложки.

Вкусы	ваниль, шоколад
Энергетическая ценность 1 порции	140 ккал
Питательных веществ в 1 порции	белки: 30 г, жиры: 1 г, углеводы: 2 г
Рекомендации по применению	Одну мерную ложку (39 г) смешайте с 350 мл воды, нежирного молока или вашего любимого напитка. Употреблять 1 порцию утром, сразу после пробуждения, 0,5-1 порцию непосредственно перед тренировкой, 1-1,5 порции сразу после тренировки.
Средняя цена (1590 г)	6000
Найти в магазине	Yandex.Market

• безупречное качество
• проверенный производитель
• высокое содержание белка
• приглушает аппетит
• приятный вкус
• отлично растворяется

 

 

“BIOTECH” HYDRO WHEY ZERO – с добавлением L-аргинина

Данный продукт – это один из лучших источников легкоусвояемого и очищенного белка. Его концентрация в одном коктейле достигает 92%. При этом углеводов и жиров протеин практически не содержит, а сахар, глютен и лактоза отсутствуют полностью. Это делает использование его при похудении и сушке доступным. Атлеты часто выбирают его как основу спортивного питания при подготовке к соревнованиям.

В составе присутствует L-аргинин, который способствует легкому и быстрому восстановлению после тренировки, снижая при этом болевые ощущения – крепатуру. Содержание других аминокислот также находится на высоком уровне.

Одна порция состоит из 25 грамм порошка, который нужно разводить в стакане обычной питьевой воды. Производитель рекомендует делить ее на две части.

Вкусы	ваниль, клубника, шоколад
Энергетическая ценность 1 порции	93 ккал
Питательных веществ в 1 порции	белки: 23 г, жиры: 0.10 г, углеводы: 0.10 г
Рекомендации по применению	Смешайте 1 порцию (25 г, 1 мерная ложка = 2 столовые ложки с верхом) с 250 мл воды и выпивайте по 2 порции в день.
Средняя цена (1816 г)	5000
Найти в магазине	Yandex.Market

• отличное качество
• относительно доступная цена
• обогащенный L-аргинином состав
• без сахара, глютена и лактозы

 

• во вкусе не ощущается горечь
• небольшое количество вкусов – всего три

 

“QNT” Delicious Whey Protein – разумное соотношение цены и качества

Особенность данного продукта в том, что он не является чистым гидролизатом. Это протеиновая смесь, в которой присутствует также концентрат и изолят. Добавка является прекрасным источником очищенного белка, без лишних жиров и углеводов. Помимо этого, в состав входят нужные организму незаменимые аминокислоты.

Производитель рекомендует свою продукцию для продвинутых спортсменов. По многим отзывам, именно он является прекрасным вариантом спортивного питания по соотношению цены и качества.

В составе, помимо протеиновой смеси, имеются незаменимые аминокислоты ВСАА – лейцин, валин и изолейцин. Коктейль готовится очень просто – 1 мерная ложка (30 грамм) разводится в 500 мл жидкости, желательно использовать воду. Прием лучше разделить на два этапа – утренний и вечерний. Если планируется тренировка, то можно пить сразу же после нее. Порошок легко растворяется и имеет хорошую однородную текстуру. В ассортименте есть несколько вкусов на выбор.

Вкусы	банан, ваниль, клубника, печенье, сливки, шоколад
Энергетическая ценность 1 порции	239 ккал
Питательных веществ в 1 порции	белки: 46 г, жиры: 3.40 г, углеводы: 5.30 г
Рекомендации по применению	Размешать одну порцию (60 г) в воде или в обезжиренном молоке. Принимать несколько раз в день: утром, как только проснулись, сразу после тренировки и при отходе ко сну.
Средняя цена (2.2 кг)	4200
Найти в магазине	Yandex.Market

• высокое качество
• приемлемая цена
• в составе есть аминокислоты ВСАА
• ассортимент вкусов
• легко готовится, хорошо растворяется

 

• не является чистым гидролизатом

 

“My Protein” Hydrolyzed Whey Protein – безглютеновый протеин

Данный протеин изготавливают по уникальной технологии, которая позволяет ускорить процесс усвоения белка организмом. Бренд заявляет, что их продукт является надежной поддержкой для любого спортсмена – и начинающего, и профессионала.

На одну порцию приходится целых 24 грамма белка, чего вполне достаточно для активного набора массы. Насыщенные жиры и сахар находятся на минимальном уровне, как и углеводы – всего один грамм на порцию сухого порошка. Помимо этого, протеин содержит комплекс аминокислот с разветвленной цепочкой, чтобы усилить эффект действия спортпита. Но производитель все равно рекомендует комбинировать данный гидролизат с ВСАА.

Готовый коктейль нужно принимать через полчаса-час после тренировки. Если в этот день она не планируется, можно разделить порцию на два-три приема и употреблять между завтраком, обедом и ужином. Ассортимента товара, грубо говоря, нет – в продаже представлен всего один классический нейтральный вкус без добавок.

Вкусы	нейтральный
Энергетическая ценность 1 порции	113 ккал
Питательных веществ в 1 порции	белки: 24 г, жиры: 1.40 г, углеводы: 1 г
Рекомендации по применению	Добавьте 150-250 мл воды или молока в наш шейкер (чем меньше жидкости, тем более густым будет ваш коктейль). Потом добавьте 1.5 большие MP ложки продукта (30 г), смешайте и выпейте. Принимайте 2-3 раза в день или по необходимости.
Средняя цена (1 кг)	3200
Найти в магазине	Yandex.Market

• приемлемая цена
• высокое содержание белка
• в состав входят аминокислоты ВСАА
• практически не содержит углеводов и жиров
• подойдет для любых тренировочных целей

 

• нет выбора вкусов

 

“Prodiet” Hydroliysate S25 – французский производитель

Основной компонент данного продукта – сладкая сыворотка из отборного коровьего молока. Ее расщепляют с помощью химической реакции веществ и воды на мелкие пептидные соединения. Чем выше степень гидролиза, тем большей горчинкой обладает вкус протеина и тем быстрее протекает его усвоение в организме.

Конкретно в данном продукте достаточно высокая степень гидролиза, отчего в коктейле присутствует ощутимая горечь. Так как вкус в линейке всего один – классический, то сладкие добавки и ароматизаторы ее не перебивают. Те, кто планируют купить данный гидролизат, должны быть к этому готовы.
В остальном показатели протеина отличные. Он хорошо справляется с набором мышечной массы, сушкой тела, ускорением метаболизма, увеличением силовых показателей, укреплением тканей и иммунитета в целом.

Коктейль можно принимать в любое время суток по своему усмотрению. Если пить после тренировки, то он поможет быстрее восстановить организм и мышцы.

Вкусы	нейтральный
Энергетическая ценность 1 порции	81 ккал
Питательных веществ в 1 порции	белки: 17,5 г, жиры: 0,23 г, углеводы: 2,3 г
Рекомендации по применению	Для приготовления 1 порции на 200-250 мл воды добавьте 23г гидролизата (1 мерный совок), перемешайте в шейкере. Принимать 2-3 порции в день: утром после пробуждения; сразу после тренировки; за 20-30 минут до сна.
Средняя цена (1 кг)	2700
Найти в магазине	Yandex

• эффективность
• приемлемая цена
• широкий спектр действия
• высокая концентрация белка
• можно принимать на белковой диете

 

• нет выбора вкусов
• присутствует легкая горчинка

 

“HYDRO” AMINO+ – в форме таблеток

Итальянский производитель позаботился, чтобы прием гидролизата был максимально быстрым, удобным и комфортным, поэтому придумал необычную и редко встречающуюся на рынке форму выпуска – таблетки. Несмотря на это, протеин обладает теми же свойствами, как и у товаров от конкурентов.

Он быстро усваивается организмом, наращивает мышцы, укрепляет волокна и ткани, способствует сушке тела и снижению жировой прослойки. Помимо основного действия, HYDRO AMINO+ повышает иммунитет и поддерживает естественный тонус. Идеально подойдет для любителей кардио-тренировок, а также футболистов и регбистов.

В составе полностью очищенные от посторонних примесей аминокислоты и пептиды, полученные из европейского сырья премиум-класса. В одной банке содержится 300 таблеток, а это целых 50 полноценных порций. На суточную дозу приходится 9 грамм белка, 0.3 грамма углеводов и 0.7 граммов жиров.

Вкусы	нейтральный
Энергетическая ценность в суточной дозе	44 ккал
Питательных веществ в суточной дозе	белки: 9 г, жиры: 0,7 г, углеводы: 0,3 г
Рекомендации по применению	принимать по 6 таблеток два раза в день, до и после тренировки.
Средняя цена (300 таблеток)	2600
Найти в магазине	Yandex.Market

• эффективность
• удобство использования
• широкий спектр действия
• отборное премиальное сырье
• высокая концентрация белка
• подойдет при снижении веса

 

• относительно высокая цена

 

“SPONSER” Premium Whey Hydro – обогащенный состав

Основа протеина – гидролизованный изолят из молочной сыворотки, дополненный такими полезным компонентом, как PepForm BCAA. Это аминокислоты, 50% которых уже находятся в переработанной пептидной форме.

Также производитель добавил уникальный компонент, который вы не встретите ни в одном из вышеописанных протеинов – органическую кислоту HMB. Это метаболит лейцина; он необходим для предотвращения ночного катаболизма и ускорения роста мышц. Продукция не содержит углеводов, жиров, сахара и лактозы.

В составе также присутствует витаминный комплекс, цинк и магний, которые участвуют в синтезе белка и поддержании нормального уровня гормона тестостерона в крови.

Лучше всего подойдет для тяжелоатлетов, пауэрлифтеров и спортсменов, тренирующихся на выносливость. В ассортименте можно встретить только белковый порошок с универсальным ванильным вкусом.

Вкусы	ваниль
Энергетическая ценность 1 порции	105 ккал
Питательных веществ в 1 порции	жиры: 0.8 г, углеводы: 0.8 г
Средняя цена (850 г)	6500
Найти в магазине	Yandex.Market

• отличный состав
• содержит витамины и микроэлементы
• высокое качество
• присутствуют уникальные компоненты
• эффективность

 

• один вкус в линейке
• высокая цена

ОПРОС: Как по-вашему, протеин — этоPoll Options are limited because JavaScript is disabled in your browser.

• полезно 68%, 102 голоса

  102 голоса 68%

  102 голоса — 68% из всех голосов

• полезно только для спортсменов 25%, 38 голосов

  38 голосов 25%

  38 голосов — 25% из всех голосов

• вредно, но при занятии спортом можно употреблять 5%, 7 голосов

  7 голосов 5%

  7 голосов — 5% из всех голосов

• вредно, очередная химия 3%, 4 голоса

  4 голоса 3%

  4 голоса — 3% из всех голосов

Всего голосов: 151

Голосовало: 147

17.04.2021

×

Вы или с вашего IP уже голосовали.

Протеин сывороточный Гидролизат [500 г]  (500 г)

Гидролизат сывороточного белка отлично подходит для быстрорастворимых напитков; менее горький по сравнению с другими гидролизатами за рынке. Предназначен для спортивного, диетического, детского и лечебного питания.

Более подробную информацию о применении Вы можете найти в разделе Рецепты в нашем интернет-магазине.

Состав: 100% сухой гидролизат сывороточного белка, произведен путем гидролиза нативного изолята сывороточного белка, степень гидролиза 25%.

Продукт НЕ СОДЕРЖИТ загустителей, стабилизаторов, красителей, ароматизаторов, подсластителей и каких-либо прочих компонентов, не указанных в составе. 

Гидролизат сывороточного белка — это сухой гидролизат сывороточного белка, произведенный путем гидролиза нативного изолята сывороточного белка, извлекаемого путем перекрестной микрофильтрации через мембраны напрямую из коровьего молока. Это позволяет сохранить исходную структуру протеина и избежать побочных продуктов, которые могут содержаться в молочной сыворотке, которая образуется при производстве сыров и других молочных продуктов. 

В отличие от концентрата и изолята сывороточного белка, гидролизат это частично разрушенный с помощью кислоты или ферментов протеин. Данный вид протеина имеет высокую степень очистки, поэтому практически не содержит жира и углеводов, а также обладает наилучшей переносимостью и растворимостью.

В составе гидролизата сывороточного протеина, по сравнению с другими животными и растительными белками, содержится наибольшее количество разветвленных аминокислот BCAA. Помимо этого, гидролизат сывороточного протеина имеет максимально приближенный к мышечной ткани аминокислотный состав.

Степень гидролиза гидролизата сывороточного белка MEAL2GOAL составляет 25%.

При производстве гидролизата сывороточного белка MEAL2GOAL используется сырье ведущих европейских производителей молока и сыров. В процессе производства осуществляется контроль качества, подтвержденный международными сертификатами ISO и HACCP. 

«Великолепие» или «Абсолютное совершенство»: какую сыворотку выбрать?

Сравнивая средства для ухода за кожей, мы задаемся вопросом – какое лучше? Часто они очень похожи: по цвету, аромату, консистенции и даже ожидаемому эффекту от применения. На что же важно обращать внимание при выборе профессиональной косметики? Разберем на примере препаратов из омолаживающей линии Chateau de Beaute.

Любой специалист при подборе средств для ухода за кожей сделает акцент на возраст, тип кожи, вид косметики (гель, молочко, скраб, сыворотка или крем), основную цель и порядок ее применения. Рассмотрим на примере сывороток. В омолаживающей линейке Chateau de Beaute их две: визуально они очень похожи, на первый взгляд, отличаются только названием. Специалисты рекомендуют эти сыворотки в качестве омолаживающих препаратов для кожи 30+. Итак, «Великолепие» Vino Sheen Fusion и «Абсолютное совершенство» Absolute Perfect. Что выбрать?

Сходство

Сыворотки обладают одинаковой консистенцией, цветом и ароматом. За счет присутствия компонентов увлажняющего фактора (гиалуроната натрия) увлажняют и смягчают кожу. В их составе есть камедь акации сенегальской и гидролизат микоризы, благодаря которым сыворотки обеспечивают заметный эффект лифтинга и разглаживают кожу. Также среди ингредиентов – антиоксиданты (ресвератрол), витамины и пептиды. Такие сыворотки специалисты рекомендуют в качестве интенсивного применения (каждый вечер) или для профилактического использования (2 раза в неделю).

Различие

• Несмотря на то, что обе сыворотки содержат главный антиоксидант и омолаживающий компонент – ретинол, который присутствует в нанокапсулах (на этикетке он значится как гидроксипинокалона ретиноат), в Сыворотке «Абсолютное совершенство» его в несколько раз больше. Это означает, что она подойдет людям с толстой и/или возрастной кожей (35+). А также эта сыворотка наделена более мощным антивозрастным действием, лучше увлажняет и поддерживает гидробаланс кожи. 

• Обладателям тонкой и/или молодой кожи с первыми морщинками стоит остановиться на Флюиде «Великолепие», который, как и сыворотка «Абсолютное совершенство», содержит высокоэффективные компоненты, способствующие разглаживанию морщин и интенсивному увлажнению.

Ваш экспертный гид по гидролизату сывороточного протеина

Если количество слогов в продукте питания перевести в количество фунтов набранной мышечной массы, гидролизат выиграет игру с добавками. Но в том-то и дело: действительно ли добавление причудливого слова что-нибудь означает, или это всего лишь куча братишек, призванных заставить вас выкладывать еще несколько долларов каждый месяц?

Хорошие вопросы. У меня есть ответы и многое другое. Сегодняшний урок питания посвящен гидролизату сыворотки, продукту, пользующемуся большой популярностью в мире наращивания мышечной массы.

Что такое гидролизат сывороточного протеина?

Молоко состоит из двух основных типов протеина: сывороточного и казеина. В грудном молоке сыворотка составляет примерно 90 процентов белка во время ранней лактации, а затем выравнивается до примерно 60:40 и 50:50 соотношения сыворотки к казеину при зрелой и поздней лактации соответственно. Сравните это с коровьим молоком, которое содержит только 20 процентов сывороточного протеина, а остальные 80 процентов поступают из казеина.

Высокое количество сывороточного протеина в грудном молоке говорит о его роли в поддержке быстрого развития, а обилие казеина в коровьем молоке, по-видимому, объясняет подавляющее большинство пищевых аллергий, связанных с потреблением молочных продуктов.

После пастеризации коровьего молока и проведения другой обработки два белка можно разделить несколькими способами. Сладкая сыворотка, которая содержит только 30-40 процентов белка, является самой базовой формой и все же ближе к пище, чем добавка. Остальные 60-70 процентов составляют преимущественно лактозный сахар и жир. Фильтрация и другие процессы очистки концентрируют его, чтобы обеспечить большее количество белка и уменьшить количество углеводов и жиров. Эти продукты называются концентратами сывороточного протеина.Продукт с содержанием общего белка 90 или более процентов называется изолятом сывороточного белка.

Независимо от уровня концентрата или изолята, все эти продукты по-прежнему состоят из чрезвычайно больших пептидных структур. Чтобы уменьшить их размер, ферменты в вашей пищеварительной системе должны разорвать связи между выбранными аминокислотными последовательностями, чтобы получить более мелкие пептиды, которые ваше тело действительно может использовать. Чтобы ускорить этот процесс, производители могут «предварительно переварить» белок для создания гидролизата белка.Это значительно облегчает всасывание.

Белковый гидролизат может быть получен от сладкой сыворотки до изолятов сывороточного белка. Кроме того, используемые ферменты и условия реакции, а также количество разорванных доступных связей определяют окончательный состав гидролизата. Чем выше степень гидролиза, тем меньше количество аминокислот в пептиде и тем более горький на вкус получается полученный белок. Таким образом, гидролизаты могут отличаться намного больше, чем концентраты или изоляты.

Для кого нужен гидролизат сыворотки?

Когда у вас есть серьезные цели по наращиванию мышечной массы, может быть трудно получить все необходимые питательные вещества из пищи. Гидролизат сыворотки отлично подходит для тех, кто ищет высококачественный источник белка, способный помочь достичь общих ежедневных целей по белку и максимизировать рост мышц. Кроме того, из-за значительного влияния на чувство сытости гидролизат белка является отличным источником белка для всех, кто хочет увеличить мышечную массу при одновременном сокращении жира.

Что делает гидролизат сывороточного протеина?

Гидролизат сывороточного протеина — идеальное питание для стимуляции роста мышц.Было продемонстрировано, что он обеспечивает наилучший анаболический ответ на силовые тренировки. Было показано, что сыворотка вызывает на 122% и 31% большую реакцию синтеза мышечного протеина на упражнения, чем казеин или соя, соответственно.

Сыворотка содержит высокий уровень лейцина, аминокислоты с разветвленной цепью, ответственной за стимуляцию синтеза мышечного белка. Он «биодоступен» и быстро переваривается, повышая уровень аминокислот в крови после употребления. Чем быстрее повышается уровень аминокислот в крови, тем выше пиковая и общая реакция синтеза мышечного белка.В этом отношении он предлагает максимальную отдачу от протеина.

Кроме того, было продемонстрировано, что сывороточный протеин улучшает восстановление после упражнений, а также увеличивает термогенез, улучшает потерю жира и уменьшает чувство голода. Таким образом, он не только отлично подходит для наращивания мышечной массы, но и является мощным питанием для борьбы с жиром! Было высказано предположение, что гидролизаты протеина усиливают полезные эффекты протеина из-за их способности повышать уровни аминокислот в плазме и более высокой пиковой концентрации, чем у нормальной сыворотки.

Хотя исследования на людях не показали, что эти различия достигают статистической значимости, аминокислотный ответ крови на гидролизат по сравнению с другими формами кажется многообещающим. Моя диссертационная работа показала, что люди, потребляющие 30 граммов гидролизата два раза в день, значительно увеличивали мышечную массу и уменьшали жировые отложения без значительного влияния на общую массу тела.

Есть ли у протеинового гидролизата недостатки или побочные эффекты? Как это ни парадоксально, хотя быстрое увеличение количества аминокислот в крови из-за гидролизата полезно для стимуляции синтеза белка, оно также увеличивает окисление аминокислот, то есть расщепление аминокислот для получения энергии.

Некоторые люди считают это повышенное окисление пустой тратой аминокислот, но это упрощенная точка зрения. То, что они используются для получения энергии, а не хранятся, не означает, что они «потрачены впустую». Сыворотка по-прежнему более анаболична по сравнению с другими источниками белка, которые не вызывают такого большого увеличения окисления аминокислот. Если вы думаете, что это недостаток, у меня есть недвижимость на берегу моря в Юте, которая может вас заинтересовать.

Другой потенциальный недостаток (если вы хотите его так назвать) заключается в том, что гидролизат протеина обычно стоит значительно дороже, чем обычный сывороточный протеин.Чем выше степень гидролизата, тем выше будет стоимость. Эй, вы получаете то, за что платите.

Хотя у некоторых людей аллергия на сыворотку, аллергия не так распространена, как на казеин, соевый или пшеничный белок. Фактически, даже у тех, кто в противном случае мог бы испытать расстройство желудка, боль, диарею, рвоту и другие расстройства желудочно-кишечного тракта, вызванные аллергией на молочные продукты, было показано, что не было значительных побочных эффектов от сильно гидролизованной сыворотки, состоящей преимущественно из низкомолекулярных пептидов. .

Тем не менее, если ваш врач посоветовал вам не употреблять этот продукт из-за состояния здоровья, не делайте этого. Хотя большинство людей очень хорошо переносят гидролизат сывороточного протеина, тем, у кого очень тяжелая аллергия на молочные продукты, следует соблюдать осторожность.

Сколько стоит принимать гидролизат протеина?

Это зависит от веса вашего тела, общего количества потребляемого белка, а также от того, потребляете ли вы его отдельно или с другими источниками белка. Поскольку гидролизат сыворотки богат лейцином, вам не нужно столько его для максимального роста мышц, сколько вы получали бы из продуктов.Например, для мужчины весом 200 фунтов, желающего увеличить мышечную массу, я бы порекомендовал 25-35 граммов гидролизата протеина сразу после тренировки или вместо вашей текущей протеиновой добавки. Для достижения того же эффекта с цельной пищей, такой как куриная грудка, может потребоваться 45 граммов.

Когда мне следует принимать гидролизат сыворотки?

Гидролизат сыворотки можно употреблять в любое время дня, но многие люди принимают гидролизат сыворотки как до, так и после тренировки.

Потребление сыворотки перед тренировкой гарантирует, что во время тренировки в кровоток будет поступать достаточное количество аминокислот.Может, это расстроит ваш желудок? Вряд ли. Гидролизат сыворотки легко усваивается и безопасен для кишечника.

Употребление его после тренировки позволяет ускорить восстановление, максимизируя анаболический ответ на упражнения и наращивая мышечную массу. Исследования показывают, что гидролизат сыворотки может усилить реакцию роста на тренировки с отягощениями, а также уменьшить жировые отложения, время восстановления и болезненность мышц. ¹

Какой гидролизат сывороточного протеина самый лучший?

Я рекомендую искать продукт, который содержит сильно гидролизованный сывороточный белок, по крайней мере, с 15-степенью гидролиза.В моем исследовании использовалась 32-градусная степень, полученная из 80-процентного концентрата сывороточного протеина, что примерно соответствует вашему желанию, потому что горечь становится отвратительной. Если вы хотите меньше углеводов и меньше жира, выберите гидролизат, полученный из изолята сывороточного протеина или 80-процентного концентрата сывороточного протеина. Если вам нужны пептиды меньшего размера, выбирайте степень от 20 до 32.

Заключение

Гидролизат сывороточного протеина — это высококачественная добавка, которая имеет множество преимуществ для бодибилдинга и здоровья.Дать ему шанс.

Список литературы

1. Бакли, Дж. Д., Томсон, Р. Л., Коутс, А. М., Хау, П. Р., ДеНичило, М. О., и Роуни, М. К. (2010). Добавка с гидролизатом сывороточного протеина ускоряет восстановление мышечной силы после эксцентрических упражнений. Журнал науки и медицины в спорте, 13 (1), 178-181.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

---

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

---

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

---

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Производство гидролизатов сывороточного протеина и его введение в молоко | Производство, переработка и питание пищевых продуктов

Были проведены эксперименты для оценки возможности производства молока, обогащенного биоактивными пептидами, полученными из гидролизатов WPC.Результаты, полученные в процессе стандартизации для достижения максимального количества короткоцепочечных биоактивных пептидов (менее 10 кДа), их включения в молоко и оценки качественных характеристик обогащенного молока, представлены в следующих подразделах.

Стандартизация процедуры ферментативного гидролиза WPC

Концентрация белкового раствора, соотношение фермента к субстрату и оптимальная степень гидролиза для получения максимального выхода низкомолекулярных пептидов были основными параметрами, которые были стандартизированы.В этом исследовании был использован флавурзим, обладающий как экзо-, так и эндопептидазной активностью, способный гидролизовать белок до молекул с молекулярной массой менее 3 кДа.

Влияние концентрации белкового раствора и степени гидролиза на время гидролиза

Продолжительность гидролиза увеличивается с увеличением концентрации белка и степени гидролиза, как показано в таблице 1. Оба эти фактора имеют значимое значение ( p <0,01 ) влияние на время гидролиза.Таким образом, можно сделать вывод, что время, необходимое для гидролиза раствора с более низкой концентрацией белка до более высокого DH, может быть эквивалентно времени, необходимому для гидролиза более высокой концентрации белка до более низкой DH .

Таблица 1 Влияние концентрации белкового раствора и степени гидролиза на время гидролиза

5% раствору белка потребовалось почти столько же времени, что и 10% раствору, чтобы достичь 5% DH. Целью исследования было обогащение молока гидролизатом протеина до максимально возможного уровня биоактивных пептидов без значительного изменения TS в молоке.Поэтому 5% раствор белка на всех уровнях гидролиза был исключен, чтобы избежать разбавления молока для дальнейших исследований.

Степень гидролиза белка — чрезвычайно важный фактор. Обширный гидролиз придает горечь за счет образования более мелких пептидов и аминокислот в гидролизате. Следовательно, необходимость осуществлять строгий контроль степени гидролиза хорошо известна (Haque and Mozaffar 1992). Кроме того, он также влияет на функциональные свойства гидолизатов.При исследовании белковых гидролизатов желтой полосы Trevally ( Selaroides leptolepis ) Klompong et al. (2007) наблюдали, что по мере увеличения DH межфазная активность (индекс активности эмульсии, индекс стабильности эмульсии, пенообразующая способность, стабильность пены) гидролизатов снижалась ( p <0,05), что, возможно, вызвано пептидами с более короткой длиной цепи. Чаще всего для ограничения DH используют остановку реакции в желаемое время путем термообработки при 85 ° C в течение 15 минут.

Также важно производить гидролизат с максимальным содержанием низкомолекулярных пептидов в кратчайшие сроки, чтобы избежать возможности микробной порчи. Было замечено, что было много вариаций времени гидролиза для достижения DH 11% в трех различных белковых растворах (Таблица 1). 10% раствор белка с 11% гидролизом был получен примерно через 7 часов, тогда как в 15% растворе белка с соотношением E / S 1:50 потребовалось более 9 часов.Иногда бывает невозможно достичь DH> 11%. Вероятно, это связано с тем, что все специфические связи, на которые должен воздействовать Flavourzyme, уже гидролизованы, и для их дальнейшего разрушения потребуется больше фермента. Поскольку 11% DH как в 10%, так и в 15% растворе заняло более 7 часов, дальнейшие исследования в этих случаях не проводились.

Влияние отношения фермента к субстрату (E / S) и концентрации белка на время гидролиза

После исключения 5% раствора белка и 11% DH были предприняты попытки изучить подходящее соотношение E / S в 10 и 15% белковые растворы для DH 5%.С увеличением концентрации фермента время гидролиза уменьшалось в обоих белковых растворах (табл. 2). Концентрация фермента (отношение E / S) оказывает значительное ( p <0,01) влияние на скорость гидролиза, независимо от концентрации белка. Между двумя белковыми растворами 15% раствору потребовалось больше времени, чем 10% раствору для достижения той же степени гидролиза с использованием того же отношения E / S. Было обнаружено, что концентрация белка также оказывает значительное (p <0,01) влияние на время гидролиза независимо от соотношения E / S.Таким образом, время гидролиза увеличивается с увеличением концентрации белка, но уменьшается с увеличением отношения E / S. Среди всего, оптимальное время 30 мин было признано наиболее подходящим периодом гидролиза, учитывая его промышленное применение для экономии времени, аналитической работы и предотвращения микробной порчи во время гидролиза.

Таблица 2 Влияние отношения E / S и концентраций белка на время получения DH 5% и влияние отношения E / S и DH на время гидролиза в 15% растворе белка

Таблица 2 показывает, что растворы белка (10 и 15%) с тремя соотношениями E / S 1:25, 1:50 и 1: 100 значительно ( p <0.01) разное время гидролиза для одного и того же DH. Однако не было значимой ( p > 0,01) разницы во времени гидролиза для 10 и 15% растворов белка с E / S 1:25. Вероятно, это было из-за высокой концентрации фермента, используемого для достижения меньшего DH, что привело бы к немедленному гидролизу всех чувствительных связей, независимо от концентрации раствора белка. Таким образом, соотношение E / S 1:50, которое потребовало 30 минут для достижения желаемой DH 5% в 10% растворе белка, было выбрано для дальнейших исследований, как уже упоминалось.При соотношении E / S 1: 100 потребовалось более 1 часа для достижения DH 5% как в 10%, так и в 15% растворах. Это было нежелательно, и поэтому соотношение E / S 1: 100 не рассматривалось в дальнейших исследованиях.

Кроме того, было окончательно выбрано соотношение E / S 1:50 для 10% раствора белка для достижения DH 5% за 30 минут. Поскольку ни одна из этих комбинаций в 15% растворе не была найдена подходящей для времени гидролиза 30 минут, были проведены дальнейшие исследования для определения подходящей комбинации DH и соотношения E / S в 15% растворе.

Влияние отношения фермента к субстрату (E: S) и степени гидролиза (DH) в 15% растворе белка на время гидролиза

Чтобы определить подходящую комбинацию отношения E / S и% DH, влияние двух E Изучали отношения / S (1:25, 1:50) и трех DH 5, 7 и 9% в 15% растворе белка на время гидролиза. В таблице 2 показана разница во времени гидролиза в 15% растворе белка при различных соотношениях DH и E / S. Видно, что DH имела значительную ( p <0.01) влияет на время гидролиза независимо от соотношения E / S. Хотя все комбинации значительно отличались друг от друга, в конечном итоге была выбрана комбинация, которая обеспечила гидролиз за 30 минут, поскольку это было наиболее подходящее время гидролиза с учетом ее преимуществ для промышленного применения, как упоминалось в предыдущем разделе. Выбор фермента определяется сочетанием эффективности и экономичности. В пределах температуры и pH можно использовать более высокую концентрацию фермента для ускорения процесса гидролиза.Здесь экономия является фактором, поскольку необходимо учитывать увеличение стоимости материалов по сравнению со скоростью реакции. Поэтому для дальнейших исследований был выбран 15% раствор белка с 7% DH, который был достигнут за 30 минут при соотношении E / S 1:25. Это подтверждается работой Asselin et al. (1989), поскольку они приняли такое же соотношение E / S для гидролиза белка.

Идентификация пептидов, присутствующих в гидролизатах 10 и 15% раствора сывороточного протеина, с помощью Tricine SDS-PAGE

Для изучения изменений в отдельных фракциях сывороточного протеина (WP) во время гидролиза и для мониторинга образования низкомолекулярных пептидов, Tricine Был проведен SDS-PAGE гидролизатов 10 и 15% WP.

На рис. 1а, б показаны профили пептидов, полученные гидролизом 10 и 15% белковых растворов. Присутствие низкомолекулярных пептидов <10 кДа очевидно в гидролизатах с разным% DH (рис. 1а, дорожки 3, 4, 5, 6), тогда как контрольный цельный WPC (рис. 1а, дорожка 2) не обнаруживал. показать любой из этих низкомолекулярных пептидов. Однако в случае 15% гидролизатов белка нижние полосы были светлее в случае 9% DH (рис. 1b, дорожка 6) и почти исчезли в гидролизате с 11% DH (рис.1b, дорожка 7), что может быть связано с дальнейшим расщеплением пептидов на аминокислоты. Это важно для снижения аллергенности продуктов, но не предполагалось, поскольку основная цель заключалась в получении низкомолекулярных пептидов примерно 6 кДа или ниже. Следовательно, 15% раствор белка с 9 и 11% DH не рассматривался, поскольку он дополнительно гидролизовал пептиды в гидролизатах. Таким образом, электрофоретические исследования подтвердили, что как в 10%, так и в 15% растворах белка присутствовали желательные пептиды с низкой молекулярной массой (<3 кДа) при гидролизе до 5 и 7% DH и гидролиз β-лактоглобулина происходил быстрее, чем α- лактальбумин.Ghosh et al. (2017) сообщили, что более высокая степень гидролиза сывороточных белков с использованием Flavourzyme привела к более светлым полосам для двух основных белковых фракций (α-лактальбумин и β-лактоглобулин), чем в контроле. Более того, количество пептидных полос ниже фракций α-лактальбумина было выше, что указывает на образование пептидов с более низкой молекулярной массой.

Рис. 1

a Tricine SDS-PAGE гидролизатов из 10% раствора сывороточного протеина. Дорожка 1 — стандарты молекулярной массы; дорожка 2 — ДПК целиком; дорожки 3, 4, 5, 6 — гидролизаты DH 5, 7, 9, 11% соответственно; полоса 7 — стандарт молекулярной массы b Из 15% раствора сывороточного протеина.Дорожка 1 — стандарты молекулярной массы; полоса 2 — тонированное молоко; дорожка 3 — ДПК целиком; дорожки 4, 5, 6, 7 — гидролизаты DH 5, 7, 9, 11%, соответственно

Результаты, полученные здесь, соответствуют выводам Schmidt and Poll (1991). Они сообщили, что пептиды с предполагаемой молекулярной массой от 2000 до 5000 Да образовывались в заметных количествах во время ферментативного гидролиза сывороточных белков. Между β-лактоглобулином и α-лактальбумином первый оказался более склонным к ферментативному гидролизу, чем второй, что опять же согласуется с Шмидтом и Поллом (1991), которые гидролизовали разные фракции сывороточного белка с помощью трипсина.Они обнаружили, что α-лактальбумин нечувствителен к действию трипсина, в то время как β-лактоглобулин быстро гидролизуется. Бриттен и Жиру (1994) гидролизовали раствор WPC (6% белка), используя Rhozyme, протеазу с широкой специфичностью из Aspergillus oryzae , и обнаружили, что половина содержания β-лактоглобулина гидролизуется, когда степень гидролиза достигает 5,1%. Из нашего исследования ясно, что α-лактальбумин более устойчив к атаке Flavourzyme, чем β-лактоглобулин.Фермент не действовал на α-лактальбумин и БСА.

Разработка молока, обогащенного функциональными пептидами

Гидролизаты из 10 и 15% растворов сывороточного белка были включены в тонированное молоко (3% жира; 8,55% сухих обезжиренных веществ) для обогащения его функциональными пептидами, образующимися во время ферментативного гидролиза сывороточных белков. Молоко, содержащее гидролизат WPC, в дальнейшем именуется «обогащенное молоко» (EM). Максимальный уровень гидролизата, который может быть добавлен в молоко, оценивался сенсорной оценкой на его приемлемость.Трицин SDS-PAGE проводили для оценки присутствия низкомолекулярных пептидов и дополнительно подтверждали исследованием RP-HPLC. Оптимизированный таким образом ЭМ анализировали на физико-химическое качество в течение 72 часов.

Оптимизация включения гидролизата сывороточного протеина в тонированное молоко (3% жирности)

Гидролизаты с DH 5, 7, 9%, приготовленные из растворов WP 10 и 15%, добавляли в молоко при 5, 10 и 20 % (об. / об.), пастеризованного и оцениваемого отдельно сенсорной комиссией судей.Молоко, обогащенное гидролизатами 9% DH, получило наименьший балл по всем сенсорным параметрам по сравнению с молоком, обогащенным гидролизатами DH 5 и 7%, что показывает, что сенсорное качество продукта снижается с увеличением% DH независимо от уровня включения. гидролизата. Было обнаружено, что 10% -ный раствор белка с 5% DH был приемлемым до 20% (v / v), в то время как гидролизат с DH 7% был приемлемым только до 10% (v / v) обогащения в молоке. Это показало, что сенсорное качество продукта снижалось по мере увеличения DH независимо от уровня включения гидролизата.Кроме того, было ясно, что молоко, обогащенное гидролизатом 15% раствора белка, было приемлемым только до 10% (об. / Об.) Включения с DH 7% и до 5% (v / v) включения с DH 9%.

Идентификация пептидов, присутствующих в молоке, обогащенном на разных уровнях 10 и 15% гидролизатами белка с помощью Tricine SDS-PAGE

Электрофоретический профиль белков в тонированном молоке и молоке, обогащенном гидролизатами из 10% раствора белка, имеющего DH 5, 7,9% и добавлено в молоко в количестве 5, 10 и 20% (об. / Об.), Показано на рис.2c. Электрофореграмма (рис. 2c) образцов обогащенного молока (дорожки 3–10) по отдельности показала всего семь полос. Заметное присутствие полос в средней части каждой дорожки, скорость миграции которых была аналогична 3 заметным полосам в тонированном молоке (дорожка 2), что подтверждает это как казеин, ß-лактоглобулин и α-лактальбумин. Однако эти 3 полосы, которые уже присутствовали в контроле, оказались толще в образцах обогащенного молока. Толщина и интенсивность полос увеличивались по мере увеличения уровня включения гидролизата в молоко.Таким образом, полосы на дорожке 4, где гидролизат (DH 5%) вводился в молоко на уровне 20% (об. / Об.), Были более заметными, чем полосы на дорожке 3, где гидролизат (DH 5%) вводился в молоко при 10% об. % (об. / об.) уровень. Точно так же гидролизат (DH 7%) вводили в молоко на уровне 5, 10 и 20% (об. / Об.) И пропускали через дорожки 5, 6 и 7, соответственно. Было обнаружено, что толщина и интенсивность полос были больше в образцах с включением гидролизата 20% (об. / Об.) (Дорожка 7), за которыми следовали образцы с включением 10% (дорожка 6) и 5% (дорожка 5).Такая же тенденция наблюдалась в образцах обогащенного молока, содержащего 9% гидролизат DH. Однако этот образец имел горький вкус, и, следовательно, было обнаружено, что включение этого гидролизата возможно только на 5% (об. / Об.) Без ухудшения вкуса обогащенного молока. Полоса казеина (29000 Да) во всех образцах оказалась однородной. Очевидно, что интенсивность полосы обратно пропорциональна степени гидролиза.

Рис. 2

c Трицин SDS-PAGE молока, обогащенного гидролизатами, из 10% раствора белка.Lane1 — Стандарт; полоса 2 — тонированное молоко; дорожки 3, 4 — молоко, обогащенное 10 и 20% (об. / об.) гидролизатом DH 5% соответственно; дорожки 5, 6, 7 — молоко, обогащенное 5, 10, 20% (об. / об.) гидролизатами DH 7% соответственно; дорожки 8, 9, 10 — молоко, обогащенное 5, 10, 20% (об. / об.) гидролизатом DH 9%, соответственно. d 15% раствор белка. Lane1 — Стандарт; полоса 2 — тонированное молоко; дорожки 3, 4 — молоко, обогащенное 10 и 20% (об. / об.) гидролизатом DH 5% соответственно; дорожки 5, 6, 7 — молоко, обогащенное 5, 10, 20% (об. / об.) гидролизатом DH 7%, соответственно; дорожки 8, 9, 10 — молоко, обогащенное 5, 10 и 20% (об. / об.) гидролизатом DH 9%, соответственно

Две заметные полосы, соответствующие 6500 и 3000 Да маркерных белков, можно было наблюдать в обогащенном молоке. (Инжир.2c, дорожки 4-7), которые отсутствовали в контрольном тонированном молоке (дорожка 2). Новые низкомолекулярные пептиды образуются в результате расщепления ферментом более высокомолекулярных белков.

На рисунке 2d показана аналогичная тенденция для молока, обогащенного гидролизатами из 15% раствора белка. Все образцы обогащенного молока показали присутствие низкомолекулярных пептидов (фиг. 2d, дорожки 3-10), тогда как их не было в контрольном молоке. Гидролизаты 15% раствора белка с DH 9% (дорожки 8-10) нежелательны из-за разрыва пептидных связей.Только 5% (об. / Об.) Этого гидролизата можно было добавить в молоко для получения приемлемого продукта. Молоко, обогащенное 10% (об. / Об.) Гидролизатом 15% -ного раствора белка, с 7% -ным DH давало наибольшее количество включенных низкомолекулярных пептидов, что также было органолептически приемлемым.

Белковые гидролизаты обладают особенно важным физиологическим свойством. Желудочно-кишечная абсорбция гидролизатов, особенно ди- и трипептидов, кажется более эффективной по сравнению как с интактным белком, так и со свободными аминокислотами (Grimble and Silk 1989; Minami et al.1992), по крайней мере, в стрессовых ситуациях с уменьшенной площадью кишечной абсорбции, нарушением пищеварительной функции и / или чрезмерным потреблением белка. Ферментативный гидролиз белков — это способ улучшить функциональность белков. Хотя степень гидролиза является важным фактором для характеристики любого гидролизата белка, она не дает полной информации о пептидном профиле (молекулярно-массовом распределении). Пептидный профиль имеет решающее значение для клинического и пищевого применения (Clemente 2000).Пептиды менее гипертоничны, чем смеси свободных аминокислот, что позволяет хорошо усваивать другие диетические компоненты и устранять осмотические проблемы. Принято считать, что мягкий гидролиз полезен, а обширный гидролиз вреден (Haque and Mozaffar 1992). Таким образом, в нашем исследовании было подтверждено исключение молока, обогащенного 9% гидролизатом. Были выбраны более низкие значения DH, равные 5 и 7%, поскольку они содержат большее количество низкомолекулярных пептидов, которые в дальнейшем не расщепляются на аминокислоты.

Chorbert et al. (1988) обнаружили, что гидролизаты WP при эксклюзионной хроматографии показали основные пики около 18, 13, 9, 5 кДа после 2,5% гидролиза, около 9 и 5 кДа после гидролиза 3,9% и около 6 и 2 кДа после гидролиза на 5,3%. Пептиды большего размера (2–5 кДа) в основном используются в качестве функциональных ингредиентов или в продуктах личной гигиены. Пептиды среднего размера (1-2 кДа) используются в лечебном и спортивном питании. Электрофоретический анализ, проведенный в настоящем исследовании, показал, что гидролиз 10 и 15% раствора белка до 5 и 7% DH также приводит к образованию пептидов <6.5 кДа.

Отбор образцов, содержащих наибольшее количество гидролизованных белков, включенных в молоко

Приемлемый уровень гидролизата из 10 и 15% раствора белка, который может быть включен в молоко, был стандартизирован путем сенсорной оценки. Присутствие низкомолекулярных пептидов в этих принятых образцах было также подтверждено электрофоретическими исследованиями. В идеале оптимизированное обогащенное молоко должно включать максимальное количество низкомолекулярных функциональных пептидов с минимальной горечью.Среди принятых комбинаций было обнаружено, что молоко при добавлении гидролизата из 10% белкового раствора, имеющего DH 5%, при уровне 20% (об. / Об.), Оно будет содержать 0,099% гидролизованного белка и достигнет общего обогащения белком до 1,99%. Точно так же молоко, содержащее гидролизат, имеющий DH 7%, из 15% раствора белка на уровне 10% (об. / Об.); будет содержать 0,1049% гидролизованного белка и достигнет общего обогащения белка 1,495%. Таким образом, было обнаружено, что образцы 10% раствора белка с DH 5 и 15% раствора с DH 7% подходят для обогащения молока пептидами,

Анализ обогащенного молока

С оптимизированными условиями гидролиза для максимального включения Для низкомолекулярных пептидов с наименьшей горечью гидролизат 10% WP с DH 5% вводили в молоко на уровне 20% (об. / об.), а жир доводили до 3%.Обогащенное молоко (ЭМ) нагревали при 72 ° С в течение 2–3 мин, охлаждали, упаковывали в полиэтиленовые пакеты и хранили в холодильнике. Контрольное и обогащенное молоко анализировали на физико-химические и сенсорные свойства.

Физико-химические характеристики обогащенного и тонированного молока

Физико-химические характеристики тонированного и обогащенного молока показаны в таблице 3. Более высокое содержание белка в обогащенном молоке связано с добавлением белков из гидролизата. Гидролизат готовили из 10% раствора белка и добавляли на уровне 20% (об. / Об.).Это объясняет увеличение содержания белка в обогащенном молоке, что также увеличивает содержание сухих веществ. PH тонированного молока составлял около 6,4, в то время как он был 6,6 для обогащенного молока. Обогащенное молоко имело более высокое значение pH из-за добавления в молоко 20% (об. / Об.) Нейтрализованного гидролизата. pH молока при 25 ° C обычно колеблется в относительно узком диапазоне от 6,5 до 6,7. Как сообщает Webb et al., В молоке есть много компонентов, которые обеспечивают буферное действие. (1974). Основными буферными группами молока являются казеины и фосфаты.Следовательно, и кислотность, и pH в обогащенном молоке находятся в пределах нормы. Более высокая вязкость (2,146 сП) обогащенного молока, вероятно, была связана с добавлением гидролизата, поскольку было обнаружено, что белки сыворотки обладают хорошей растворимостью и способностью связывать воду (Foegeding et al. 2002). Обогащенное молоко показало более низкую скорость вспенивания, чем тонированное молоко, что указывает на то, что добавленные гидролизаты проявляли эмульгирующие свойства, которые могли препятствовать скорости вспенивания в конечном обогащенном молоке. Некоторые пептиды обладают лучшими эмульгирующими свойствами, чем молочные белки.Эксперименты показали, что контролируемый ферментативный гидролиз, особенно с трипсином; улучшить нефтеемкость более чем на 600% (Haque, 1993).

Таблица 3 Физико-химические характеристики обогащенного и тонированного молока

Влияние термической обработки на профиль пептидов в гидролизатах и ​​обогащенном молоке

Предполагалось, что могут происходить изменения в пептидах, присутствующих в гидролизате и обогащенном молоке во время конденсация, распылительная сушка и стерилизация в результате термической обработки.Поэтому была предпринята попытка оценить изменения пептидов после различных термических обработок с помощью электрофореза. Гидролизаты 10% раствора WP с 5% DH подвергали различным обработкам, таким как сублимационная сушка, кипячение в течение 30 мин и распылительная сушка. Точно так же тонированное молоко, обогащенное 40% (об. / Об.) Этого гидролизата, также подвергалось сублимационной сушке, вакуумной конденсации до 35-40% TS и распылительной сушке. Тонированное молоко, обогащенное 20 и 40% (об. / Об.) Гидролизатом, гомогенизировали при давлении 1500 фунтов на квадратный дюйм после предварительного нагрева до примерно 65 ° C.После этого стерилизацию обогащенного молока в бутылках с добавлением 0,01% цитрата натрия и без него проводили в автоклаве при 15 фунт / кв. Дюйм в течение 15 мин (121 ° C). Контрольное тонированное молоко не коагулировало, тогда как обогащенное молоко свертывалось во время стерилизации. Предполагается, что добавление гидролизата WP в обогащенное молоко может быть причиной более низкой термостойкости обогащенного молока. Ранний (1998) сообщил, что казеин имеет тенденцию выпадать в осадок, если молоко подвергается воздействию температуры> 100 ° C в течение длительного периода времени.Даже добавление цитрата натрия не улучшило термостабильность. Поэтому рекомендуется не стерилизовать образцы обогащенного молока, а пастеризовать их для использования в качестве молока, обогащенного жидкостью. Однако обогащенное молоко можно сушить распылением для увеличения срока хранения. Subtil et al. (2014) успешно высушенный распылением гидролизованный казеин с использованием гуммиарабика в качестве агента-носителя для уменьшения горького вкуса.

Электрофоретические исследования были проведены для оценки изменений пептидных профилей этих образцов.На рисунке 3 показаны электрофореграммы образцов WPC, гидролизатов, тонированного и обогащенного молока после различных обработок. Контрольные образцы цельного WPC, гидролизата, тонированного молока, обогащенного 40% (об. / Об.) Этого гидролизата, и тонированного молока прогоняли по дорожкам 2, 3, 7 и 8, соответственно; в то время как обработанные образцы обрабатывали в дорожках 4, 5 и 6. Электрофореграмма отражала минимальные изменения, происходящие в образцах из-за нагрева и сублимационной сушки гидролизатов. Точно так же не наблюдали различий в пептидах с более низкой молекулярной массой лиофилизированного молока (дорожка 6) и обогащенного молока (дорожка 7), что еще раз указывает на отсутствие изменений, происходящих в пептидах с более низкой молекулярной массой обогащенного молока.

Рис. 3

Трицин SDS-PAGE образцов WPC, гидролизата, тонированного и обогащенного молока после различных обработок. Дорожка 1 — Стандарт; дорожка 2 — ДПК целиком; дорожки 3, 4, 5 — гидролизат, вареный, лиофилизированный гидролизат соответственно; дорожка 6 — замороженное обогащенное молоко; полоса 7 — обогащенное молоко; дорожка 8 — тонированное молоко

В нашем исследовании ни сублимационная сушка, ни нагревание не выявили каких-либо значительных изменений пептидного профиля. Это может быть связано с тем, что пептиды в основном находятся в своей первичной структуре, а тепловая денатурация не включает разрыв или изменения пептидных связей и, следовательно, не может быть обнаружена электрофоретически.Гидролизат и обогащенное молоко нагревали до температуры более 70 ° C, и денатурация сывороточных белков начиналась при температурах выше 65 ° C с последующей агрегацией и осаждением. В молочных системах эти денатурированные сывороточные белки остаются в суспензии, прикрепляясь к мицеллам казеина. Это может быть причиной того, что белковые полосы α-лактальбумина, β-лактоглобулина кажутся менее заметными после различных обработок в настоящих электрофоретических исследованиях. Таким образом, в настоящем электрофоретическом исследовании не наблюдалось никаких изменений в профилях пептидов гидролизатов и обогащенного молока после различных обработок, таких как сублимационная сушка, кипячение, концентрирование и распылительная сушка, которые показали, что обогащенное молоко можно сушить распылением без каких-либо значительная потеря пептидов в высушенном продукте.

Анализ с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой (RP-HPLC)

Для подтверждения профилей пептидов, полученных с помощью электрофореза, пять образцов были проанализированы методом RP-HPLC. На рисунке 4e показано наложение хроматограмм ОФ-ВЭЖХ WPH, тонированного молока (TM) и молока, обогащенного 20% гидролизатами (EM ₂₀ ). Все хроматограммы показали некоторые общие пики, которые элюировались между 3 и 35 мин. Однако на хроматограмме WPH были видны 3 основных пика со временем удерживания 8.5, 10,36 и 20,2 мин. Эти 3 пика отсутствуют на хроматограмме TM, но могут быть четко видны на хроматограмме EM ₂₀ . Таким образом, подтверждается, что эти 3 пика, соответствующие образовавшимся новым пептидам, были внесены WPH в обогащенное молоко. Количество пиков в EM было больше, чем в TM.

Рис.4

e Профиль RP-HPLC белков сыворотки и пептидов в WPH, тонированном молоке и обогащенном молоке с 20% (об. / Об.) Гидролизатом (EM ₂₀ ) и f 40% (v / v) гидролизат (EM ₄₀ )

Аналогично рис.4f демонстрирует наложение хроматограмм ОФ-ВЭЖХ молока, обогащенного 40% гидролизатом (EM ₄₀ ). Площади пиков 3 пептидов, внесенных гидролизатом WP, увеличились в EM ₄₀ . Таким образом, увеличение уровня включения гидролизата с 20 до 40% ясно показывает увеличение количества пептидов в обогащенном молоке. Было обнаружено, что этот более высокий уровень (40%) включения гидролизата дает приемлемый продукт — обогащенное молоко без ощутимой горечи с 1% крахмала в качестве маскирующего агента вместе с ароматом и 7% сахара (результаты не показаны).

Эрнандес-Ледесма и др. (2005) разделили и охарактеризовали сывороточные белки с помощью RP-HPLC. Точно так же аналитическая идентификация и разделение пептидов в различных пищевых продуктах, включая гидролизаты белков, молочные и мясные продукты, были предприняты несколькими исследователями с помощью метода RP-HPLC в соответствии с их гидрофобностью, размером молекул и чистым зарядом (Fenelon et al. 2000). В настоящем исследовании присутствие пептидов в гидролизате и его большее присутствие в обогащенном молоке, чем в молоке, было подтверждено анализом RP-HPLC.

Ингибирующая активность АПФ

Ингибирующая активность АПФ тестируемых образцов показана на рис. 5. Максимальное ингибирование АПФ (% IACE) наблюдалось в гидролизате WP, затем в обогащенном молоке (EM ₂₀ ), тонированном молоке и растворе WP. . Разница в% IACE между образцами была значимой ( p <0,01). Высокая ингибирующая активность гидролизата АПФ может быть связана с присутствием пептидов, высвобождаемых в результате ферментативного гидролиза сывороточных белков.Goudarzi et al. (2012) сообщили о высвобождении пептидов, ингибирующих АПФ, из сывороточных белков в результате процессов ферментативного гидролиза и ферментации. Обогащенное молоко имело следующую по величине ингибирующую активность АПФ. Это может быть связано с добавлением гидролизатов в молоко, что указывает на то, что пептиды, ингибирующие АПФ, все еще остаются нетронутыми и активными даже после процесса пастеризации. Немного более высокая активность в тонированном молоке, чем в растворе цельного сывороточного протеина, может быть связана с казеином и другими компонентами молока.

Рис. 5

Активность ингибирования АПФ в WPC, его гидролизате, тонированном и обогащенном молоке. Различные буквы в верхней части столбцов указывают на существенные различия ( p <0,01). Столбики ошибок указывают на стандартное отклонение от среднего значения ( n = 3)

Ангиотензин-I-превращающий фермент (АПФ) является ключевым ферментом в регуляции периферического кровяного давления (Tavares et al. 2011a, b). Сильная ингибирующая активность АПФ более 70% (при 1 мг / мл) была получена после переваривания казеина трипсином, термолизином (Коли, 2004).Эрнандес-Ледесма и др. (2003) сообщили, что процентное значение IACE сыворотки из полножирного йогурта, обезжиренного йогурта и детской смеси составляет 43,4, 39,5 и 87,2% соответственно. Pihlanto-Leppälä et al. (2000) охарактеризовали пептиды со свойством ингибирования АПФ в результате переваривания сывороточного белка. Они обнаружили, что пептиды в гидролизатах обладают большей активностью ингибирования АПФ по сравнению со всем WPC. Кроме того, Foltz et al. (2009) показали, что трипептид Ile-Pro-Pro, пептид, ингибирующий АПФ, избирательно ускользает от кишечной деградации и попадает в кровоток в незавершенном виде, что является многообещающим открытием.

Таким образом, гидролизат WP содержит пептиды, которые являются потенциальными ингибиторами АПФ. Настоящее исследование также показало, что 10% протеиновый гидролизат с 5% DH обладает очень хорошей ингибирующей активностью в отношении АПФ и при введении в молоко на приемлемом уровне 20% (об. / Об.) Может увеличивать ингибирующую активность молока в отношении АПФ. , таким образом улучшая его биологическое свойство повышенной антигипертензивной активности.

Белковые гидролизаты — обзор

6.5.1.2.4 Ферментативный гидролиз

WPH имеют улучшенную растворимость, пониженную вязкость и гелеобразование, а также значительно меняют физико-функциональные свойства (растворимость, пенообразование, эмульгирование) по сравнению с нативными белками сыворотки (Конрад , 1996; Singh & Dalgleish, 1998; Van den Berg, 1979).Обычными ферментами, используемыми для гидролиза сывороточных белков, являются трипсин, химотрипсин, пепсин и микробные протеиназы. Тем не менее, нативные сывороточные белки нелегко гидролизуются пепсином и трипсином из-за их вышеупомянутой компактной третичной структуры, которая скрывает большую часть чувствительных к ферментам пептидных связей. Следовательно, перед ферментативным гидролизом необходима физическая и / или химическая денатурация сывороточных белков. Например, термическая обработка (60–75 ° C) увеличивала степень гидролиза WPC93 протеиназой K в средах с нейтральным и щелочным pH (Stanciuc, Hintoiu, Stanciu, & Rapeanu, 2010).Это связано с тем, что при таком pH и температуре нативный димер β-Lg, основного белка в сыворотке, диссоциирует на мономеры и высвобождает первоначально скрытые гидрофобные остатки на внешнюю поверхность, тем самым увеличивая доступность специфических пептидных связей для ферментативных расщепление. Однако степень гидролиза значительно снизилась при дальнейшем нагревании до 80 ° C, вероятно, из-за образования ковалентных и / или нековалентных агрегатов, которые скрывают специфические пептидные связи от ферментативного расщепления.Нагревание белков перед ферментативным гидролизом частично определяет природу пептидов, высвобождаемых во время гидролиза, и, следовательно, их результирующие функции (Adjonu, Doran, Torley, & Agboola, 2013).

Было обнаружено, что модификация конформации сывороточного белка путем сульфитолиза увеличивает скорость гидролиза пепсином и трипсином по сравнению с интактными белками (Kananen et al., 2000). Сульфитолиз — это обратимая реакция сульфита со связями –S – S–, и эта реакция специфична для связей –S – S– остатков цистина, поэтому побочных реакций с пептидами и белками можно избежать (Kananen et al., 2000). Таким образом, сульфитолиз предлагает привлекательную альтернативу методам, основанным на нагревании и давлении, для изменения конформации сывороточных белков для последующего протеолиза. Влияние конъюгации углеводов на термостабильность WPH хорошо задокументировано (Drapala, Auty, Mulvihill, & O’Mahony, 2016a; Mulcahy, Park, Drake, Mulvihill, & O’Mahony, 2016). Конъюгирование 5% WPI или WPH с 5% MD (степень гидролиза 9,3%) увеличивало стабильность растворов сывороточного протеина / пептида при последующей термической обработке в присутствии 40 мМ NaCl (Mulcahy et al., 2016). Конъюгирование достигалось нагреванием растворов при 90 ° C в течение 8 часов при начальном pH 8,2. Повышенная термостабильность сывороточных белков, конъюгированных с MD, возможно, связана с усилением стеариновых препятствий в результате присоединения углеводных боковых цепей, что помогает уменьшить агрегацию, вызванную нагреванием. Авторы далее подтвердили, что на скорость и степень конъюгации сывороточного белка с углеводом влияет физическое состояние сывороточных белков (интактных или гидролизованных).Термостабильность модельных эмульсий детских смесей на основе гидролизованных ингредиентов сывороточного белка была заметно улучшена за счет модификации белковых ингредиентов путем конъюгации с углеводами (Drapala et al., 2016a; Drapala, Auty, Mulvihill, & O’Mahony, 2016b). Предварительный нагрев гидролизованного сывороточного протеина перед его использованием в эмульсиях детских смесей привел к повышенной термостабильности конечных эмульсий за счет снижения уровня реактивных групп –SH за счет белок-белковых взаимодействий (Drapala et al., 2016а). По сравнению с WPH-лецитином или WPH-CITREM (сложные эфиры моно- и диглицеридов лимонной кислоты), WPH-MD имеет превосходную термостабильность после того, как эмульсии детской смеси нагревали при 95 ° C в течение 15 минут и хранили при 40 ° C в течение 10 минут. дней (Drapala et al., 2016b). Авторы предположили, что ковалентное присоединение MD к WPH снижает взаимодействие на границе раздела между слоем белки / пептиды-MD и белками / пептидами в сыворотке из-за стерического вмешательства.

Гидролизат сывороточного протеина: функциональные свойства, питательная ценность и использование в рецептуре напитков

https: // doi.org / 10.1016 / j.foodchem.2006.04.021Get rights and content

Abstract

Целью исследования было проанализировать функциональные и питательные свойства ферментативно гидролизованного концентрата сывороточного протеина (WPC) и составить рецептуру смеси для напитков. Гидролизаты WPC были получены с использованием грибковой протеазы и папаина с интервалами времени 20, 40 и 60 минут и были проанализированы на предмет приблизительного состава и функциональных свойств. Напиток был приготовлен из гидролизованного WPC, сухого обезжиренного молока, какао, жидкой глюкозы, сахара и растительного жира и проанализирован на предмет физико-химических свойств, сенсорных свойств и сохраняемости.Результаты показали, что содержание белка в WPC составляло 75,6% и немного снижалось при обработке ферментом (69,6%). Водопоглощающая способность WPC составляла 10 мл / 100 г и увеличивалась в обработанных ферментом образцах с 16 до 34 мл / 100 г с увеличением времени гидролиза. Емкость эмульсии (45 мл масла / г контрольного WPC) показывает тенденцию к снижению с увеличением времени гидролиза. Обработка ферментом немного увеличила емкость пены в трех образцах, но снизила стабильность пены в целом. Картина гель-фильтрации образцов, обработанных ферментом, показала увеличение фракций с низкой молекулярной массой.Аминокислотный профиль показал более высокое содержание метионина в образцах, обработанных ферментами, по сравнению с контролем. Усвояемость белка in vitro необработанного WPC составляла 25% и повышалась во всех обработанных образцах в разной степени (69–70%). Рецептурный напиток содержал 52% белка, 10% жира и 6,6% золы. Не было значительных различий в сенсорных характеристиках приготовленного и коммерческого напитка. Составленный напиток можно было хранить в контейнере из ПЭТ в течение 30 дней.

Ключевые слова

Концентрат сывороточного протеина

Ферментный гидролиз

Физико-химические свойства

Биологически активные пептиды

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

Полный текст

Copyright © 2006 Elsevier Ltd.Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Цитирующие статьи

Гидролизаты сывороточного белка верблюда вызвали остановку клеточного цикла G2 / M при колоректальной карциноме человека

Влияние пепсина на степень гидролиза (% DH) в различных условиях, включая соотношение E: S, время и температура

Анализ высвобождения свободного аминного азота (F-AN) во время протеолиза позволяет получить общую степень гидролиза белка по сравнению с интактным образцом белка.Для достижения необходимого уровня гидролиза соотношение фермент: субстрат, время и температура гидролиза являются одними из основных переменных, которые необходимо учитывать при получении гидролизатов белка. Значения DH (%) CWPH представлены в таблице 1. В целом было замечено, что значения DH в основном увеличивались со временем инкубации, в то время как не было очевидного значительного влияния концентрации фермента на% DH. Аналогичным образом, прямой корреляции между температурой и значениями DH не наблюдалось.Для гидролизатов, полученных при концентрации фермента 2%, максимальное значение DH было выражено гидролизатами P-1.1, полученными при 30 ℃ в течение 2 часов гидролиза. В то время как для гидролизатов, полученных при концентрации фермента 1%, самый высокий DH наблюдался при 37 ℃, а для концентрации фермента 0,5% самый высокий DH был обнаружен при 45 ° C. В целом гидролизат P-5.3 и P-4.1 показал более высокий выход гидролиза со значениями DH ~ 57% и 52% соответственно, что было достигнуто через 2 и 6 часов времени гидролиза и 0.5 и 1,0% фермента соответственно. Увеличение степени гидролиза со временем гидролиза может быть связано с большей доступностью сайтов расщепления при денатурации нативных белков, что приводит к более высокой реакционной способности ферментов и, следовательно, к разрушению большего количества пептидных связей ¹¹ . Полученные результаты согласуются с более ранними исследованиями, в которых значения DH гидролизатов, полученных из белков верблюжьей сыворотки с использованием желудочно-кишечного фермента при 37 ℃, были аналогичны приведенным здесь ¹² .Исследования, связанные с влиянием переваривания пепсина в различных условиях на степень гидролиза белков верблюжьей сыворотки, довольно ограничены. Однако сообщалось о величине DH 20,5% при пептическом переваривании белков цельного верблюжьего молока в течение 30 мин. ¹³ . Эти результаты были относительно выше, чем у Салами и др. ¹⁴ , где гидролиз α-лактальбумина, основного сывороточного протеина, показал максимальное значение DH ~ 10% при 37 ℃ в течение 180 минут. Эти изменения могут быть просто результатом использования другой белковой матрицы верблюжьего молока, поскольку сыворотка, используемая в текущем исследовании, состояла из всех основных сывороточных белков, таких как α-лактальбумин, сывороточные альбумины, лактоферрины и другие второстепенные сывороточные белки.Это может объяснить более высокий DH, полученный в настоящем исследовании.

Таблица 1 Влияние параметров гидролиза на степень гидролиза (DH%) и противовоспалительные свойства пептических гидролизатов белков сыворотки верблюда.

Пептидные профили интактных белков верблюжьей сыворотки и их пептических гидролизатов

Обращенная фазовая ультраэффективная жидкостная хроматография (RP-UPLC) использовалась для характеристики интактного CWP и его пептических гидролизатов. Полученные результаты представлены на рис.1а. Было обнаружено, что для интактного CWP один острый пик, принадлежащий α-лактальбумину (LA), наблюдался между 80 и 85 мин. В пределах времени удерживания от 70 до 80 минут наблюдались другие элюированные пики, в основном представляющие другие второстепенные белки сыворотки, такие как сывороточные глобулины, лактоферрин, иммуноглобулин, лактопероксидаза. Гидролиз пепсина привел к полной деградации всех интактных сывороточных белков, о чем свидетельствует пептидный профиль (рис. 1а). Результаты согласуются с предыдущими выводами, согласно которым моделирование желудочно-кишечного переваривания концентратов верблюжьего сывороточного протеина, обработанных пепсином, трипсином и химотрипсином, привело к полному гидролизу верблюжьих сывороточных белков ¹ .Результаты показывают, что гидролизаты сывороточного белка верблюда содержат значительную долю пептидов среднего размера, обладающих широким диапазоном гидрофобности и элюируемых между 35 и 70 мин. Меньшие пики более коротких пептидов также наблюдались между временем удерживания 0–30 мин. В предыдущих исследованиях также сообщалось, что различные гидролизаты белка верблюжьего молока, полученные с помощью трипсина, демонстрировали короткие пептидные пики, которые элюировались в течение определенного периода времени удерживания, что указывает на то, что гидролизаты белка верблюжьего молока содержат пептиды, имеющие широкий диапазон гидрофобности ¹⁵ .

Рисунок 1

Пептидный профиль и антипролиферативный скрининг гидролизатов сывороточного белка верблюда (P-4.3 и P-5.2). (a ) Пептидный профиль RP-UPLC CWP и их пепсин генерировал гидролизаты P-5.2 и P-4.3. ( b ) Гидролизаты сывороточного белка верблюда Р-4.3 и Р-5.2 ингибируют рост клеток НСТ116. Жизнеспособность клеток HCT116 после обработки возрастающими концентрациями CWPH P-4.3 и P-5.2 в течение 48 часов. 231 мкг / мл — это IC ₅₀ для CWPH P-4.3, 221 мкг / мл — это IC ₅₀ для CWPH P-5.2. ( c ) Количественное распределение клеток HCT116 в различных фазах клеточного цикла после обработки верблюжьим CWPH P-4.3 (231 мкг / мл) в течение 24 часов, 48 часов и 72 часов. Статистический анализ проводился с помощью t-критерия Стьюдента с использованием программного обеспечения GraphPad Prism, и p <0,05 считалось статистически значимым. * p <0,05, ** p <0,01, *** p <0,001 и **** p <0,0001.

Влияние параметров гидролиза (E: S, время и температура) на противовоспалительную активность

Воспаление — один из наиболее ценных механизмов защиты или опасных для жизни побочных эффектов в нашем организме.Однако секреция огромного количества медиаторов воспаления, включая простагландин-E2 (PGE2), оксид азота (NO) и провоспалительные цитокины, такие как IL-1β, TNF-α и IL-6 t, была связана с такими заболеваниями, как ожирение, диабет и рак. Поиск противовоспалительных биоактивных соединений на основе пищевых продуктов показал, что молоко и производные от него биоактивные пептиды потенциально могут быть использованы в качестве сильнодействующих противовоспалительных биоактивных соединений пищевого происхождения ¹⁶ . Противовоспалительная активность CWPH представлена ​​в виде эквивалента стандартного противовоспалительного препарата диклофенака натрия на мг белкового эквивалента [DSE (мкг / мг PE)] в таблице 1.Результаты показывают, что интактные белки верблюжьей сыворотки обладают присущей им противовоспалительной способностью. О подобном эффекте сообщалось у крыс с индуцированным стрептозотоцином диабетом, получавшим неденатурированный сывороточный белок верблюда ¹⁷ . Гидролиз CWP пепсином продемонстрировал значительное усиление (p <0,05) противовоспалительного действия гидролизатов по сравнению с интактным CWP (таблица 1). В целом противовоспалительная активность 18 гидролизатов колеблется от 732,50 (P6.1) до 3779,16 (P2.1) мкг DSE / мг PE. Некоторые из гидролизатов, полученных здесь с верблюжьей сывороткой, проявляли активность выше, чем те, о которых сообщалось ранее ¹⁸ , тогда как другие были сопоставимы с таковыми, о которых сообщали Kamal et al. ⁹ . В предыдущих исследованиях сообщалось о роли биоактивных пептидов, полученных из молока, в уменьшении воспаления, и был идентифицирован противовоспалительный пептид «VPP» ¹⁹ . Кроме того, сообщалось, что гидролиз зеинового белка, управляемый алкалазой и термолизом, приводит к образованию трех новых пептидов PPYLSP, IIGGAL и FLPPVTSMG с сильной противовоспалительной активностью, которые регулируют экспрессию маркера воспаления VCAM и ICAM ²⁰ .Настоящее исследование окончательно устанавливает противовоспалительный потенциал гидролизатов, полученных из верблюжьей сыворотки, и открывает путь для дальнейших исследований с целью выяснения молекулярного механизма противовоспалительных свойств этих гидролизатов.

Цитотоксичность выбранных CWPH против раковых клеток HCT116

Антипролиферативные эффекты белков молока были изучены ранее и становятся весьма многообещающими средствами для преодоления рецидивов и побочных эффектов химиотерапии. ²¹ .Известно, что верблюжье молоко вызывает остановку роста клеток рака груди ²² и вызывает значительный эффект апоптоза в клетках HepG2 ²³ . 18 CWPH были проверены на противораковую активность на клетках HepG2 (дополнительный рис. S1) и два многообещающих CWPH P-4.3 и P-5.2 на клетках HCT116 (рис. 1b). Клетки HCT116 оказались лучшей моделью для изучения антионкогенного механизма. Влияние CWPH на выживаемость клеток HCT116 исследовали как при низких (0,01–10 мкг / мл), так и при высоких (10–1000 мкг / мл) диапазонах концентраций.Аппроксимация сигмоидальной кривой «концентрация – ответ» показала, что концентрация, необходимая для снижения выживаемости до 50% (IC ₅₀ ) для CWPH P-4.3 и P5.2, составляла 231,0 и 221,0 мкг / мл соответственно.

Анализ распределения клеточного цикла, индуцированного CWPH

Влияние CWPH P-4.3 и P5.2 на HCT116 на распределение клеточного цикла исследовали с помощью анализа FACS. При раке терапевтические молекулы нарушают естественный баланс раковых клеток, либо модулируя контрольные точки клеточного цикла, либо вызывая невосстановимые повреждения ДНК и, в конечном итоге, способствуя гибели клеток.Более раннее исследование, в котором белки молока вызывали остановку клеточного цикла ²⁴ , побудило нас изучить молекулярный механизм этих гидролизатов. P-4.3 (231 мкг / мл) показал значительную (p <0,05) остановку G2 / M при лечении в течение 24 часов (15-25%), 48 часов (2-19%) и 72 часов (3-17%). (Рис. 1в). Это могло указывать на то, что P-4.3 индуцировал апоптоз клеток HCT116 или запускал нецитотоксическую остановку роста. P-5.2 (221 мкг / мл) не продемонстрировал какого-либо значимого и последовательного воздействия на развитие клеточного цикла клеток HCT116.Следовательно, CWPH P-4.3 был дополнительно подвергнут молекулярному анализу его эффекторных молекул.

Влияние CWPH P-4.3 на переменные клеточного цикла

CWPH P-4.3-индуцированная остановка G2 / M в HCT116. Анализы экспрессии белка HCT116 с обработкой P-4.3 или без нее (231 мкг / мл через 24 часа, 48 часов и 72 часа) проводили с помощью вестерн-блоттинга (рис. 2). Циклинзависимая киназа 1 (Cdk1) обычно связывается с циклином B1, образуя главный регулятор митоза. Синтез и ядерный импорт активированного комплекса циклин B1 / Cdk1 достигают максимума в поздней S-фазе и ранней G2-фазе.Инактивация Cdk1 и протеолиз Cyclin B1 останавливает клеточное деление и способствует выходу клеток из митоза. В настоящем исследовании CWPH P-4.3 снижал экспрессию Cdk1 и cyclin B1 зависимым от времени способом (Fig. 2a, b), переводя G2 / M арест ²⁵ . В клеточном цикле каждая контрольная точка строго регулируется для поддержания целостности генома и клеточного гомеостаза. Ингибирующее фосфорилирование Cdk1 по Tyr15 и Thr14 является механизмом обратной связи, который, как известно, регулирует клеточный цикл.Предполагается, что повреждение ДНК происходит в фазе G2 клеточного цикла, поддерживает Cdk1 в неактивном фосфорилированном по Thr14 и Tyr15 состоянии ²⁶ . Здесь наблюдалась значительная индукция экспрессии p-Cdk1 (Tyr15), подтверждающая регуляторный эффект, который приводил к остановке клеточного цикла (рис. 2a, b). Известно, что фосфорилирование гистона h4 Ser-10 (p-Hh4) происходит, когда клетки обрабатывают антипролиферативными агентами, что указывает на повреждение ДНК ²⁷ . FACS проиллюстрировал фазу subG1 через 48 и 72 часа после лечения (рис.1c), и это в значительной степени отражается в уровнях белка p-Hh4 (рис. 2a, b), что свидетельствует о повреждении ДНК, вызванном P-4.3 ²⁸ .

Фиг. 2

Ингибирующее действие CWPH P-4.3 на маркеры прогрессирования клеточного цикла в клетках HCT116. ( a , c ) Вестерн-блот-анализ регуляторных белков клеточного цикла из HCT116, обработанных CWPH P-4.3 (231 мкг / мл) в течение 24 часов, 48 часов и 72 часов. ( b , d ) Интенсивность каждой полосы определяли количественно для анализа экспрессии белка с использованием ImageJ, нормализованной относительно их соответствующих полос контроля нагрузки.Значения выражены как отношение необработанного контроля в логарифмической кратности. Статистический анализ проводился с помощью t-критерия Стьюдента с использованием программного обеспечения GraphPad Prism, и p <0,05 считалось статистически значимым. * p <0,05, ** p <0,01, *** p <0,001 и **** p <0,0001.

Мы исследовали эффект перекрестного разговора p53 / p21 после лечения P-4.3. p53 является опухолевым супрессором, который действует как доминантный узел в клеточных путях, отвечая на различные события, такие как повреждение ДНК, онкогенные стимулы и химический стресс.Сообщалось, что сверхэкспрессия p53 вызывает как остановку роста, так и апоптоз ²⁹ . Ингибитор CDK p21 (также известный как p21WAF1 / Cip1) действует как негативный регулятор p53-зависимого апоптоза. P21 инактивирует комплекс cyclinB1 / Cdk1, что приводит к остановке клеточного цикла ³⁰ . В этом исследовании через 48 часов после обработки CWPH P-4.3 наблюдались индукция p53 и ингибирование p21 (рис. 2c, d). Прерывание строго регулируемых путей — это классическое свойство раковых клеток, поддерживающее нерегулярность пути p21 / p53 при воздействии нашего антипролиферативного агента.Экспрессия белка p21 отличается от экспрессии белка p53 среди обработанных и необработанных клеток HCT116. Это может указывать на независимый от р53 механизм CWPH. Было доказано, что различные факторы транскрипции регулируют p21 независимо от p53 и p150. ^Sal2 , пример: ³¹ . Это открывает двери для дополнительных исследований, чтобы понять противораковый эффект, вызванный CWPH.

Идентификация и физико-химические свойства пептида

На основании их значительного потенциального противоракового действия (рис.1b), CWPH P-4.3 и P-5.2 были обработаны для идентификации пептидной последовательности, а также было выполнено взаимодействие выбранных пептидов с белком-мишенью посредством анализа in-silico. Все результаты, относящиеся к количеству пептидов, их последовательности, физико-химическим свойствам и прогнозам, связанным с их противовоспалительным и противораковым потенциалом, представлены в таблице 2. В целом, 162 и 44 пептида были идентифицированы в CWPH P-4.3 и P-5.2. соответственно (дополнительный материал — таблица S1). В зависимости от значения средней локальной достоверности (ALC) не менее 80% и рейтинга пептидов> 0.50, пептиды были представлены как потенциально биологически активные пептиды (BAP). Всего 42 и 19 пептидов из P-4.3 и P-5.2, соответственно, были квалифицированы (рейтинг пептидов> 0,5) как BAP (таблица 2). Молекулярная масса этих BAP варьировалась от 234,32 г / моль для LC (P-5.2) до 1563,79 г / моль для AVLPFQEPVPDPVR (P-4.3). Значения изоэлектрической точки варьировали от pH 0,9 до 10,9 среди генерируемых пептидов. Ранее сообщалось, что противовоспалительное действие белков или производных от них пептидов сильно зависит от последовательности и структуры пептидов.Декапептид, полученный из казеина буйволиного молока, подавлял уровни воспалительных цитокинов, пролиферацию спленоцитов и улучшал фагоцитоз у мышей, которые являются классическими противовоспалительными индикаторами ³² . Было показано, что пептид, производный от αS1-казеина, ингибирует активность матриксных металлопротеиназ (MMP-9) в клетках HT-29 и SW480 ³³ . Следовательно, веб-серверы прогнозирования противораковых пептидов (ANTICP) и противовоспалительных (AIP) были использованы для определения противоопухолевых и противовоспалительных пептидов соответственно.Они используют модели поддерживающих векторных машин (SVM), разработанные на основе аминокислотного состава и особенностей бинарного профиля, чтобы прогнозировать активность пептидов. Было предсказано, что все пептиды, кроме DVTVLDNTDGK (P-4.3), ESLPGVPPPSGQPLL и DLPLMT (P-5.2), обладают противовоспалительным действием (AIP). Токсичность препятствует включению BAP в пищевую и фармацевтическую промышленность. Таким образом, полученные пептиды были проверены на их токсичность с использованием ToxinPred, и ни один из них не оказался токсичным. Кроме того, все пептиды, кроме GLFQ, GLHPVPQP и GLHPVPQPLV (P-4.3), как предполагалось, обладают противораковым потенциалом.

Таблица 2 Анализ in silico противовоспалительного, противоракового и токсического прогнозирования идентифицированных потенциальных биологически активных пептидов из CWPH P4.3 и 5.2, что выявлено с помощью их оценки пептидов ToxinPred, Anticp и AIPpred.

Предсказание макромолекулярной мишени

Подход молекулярного стыковки in silico был выполнен с использованием двух пептидных последовательностей (AHLEQVLLR и ALPNIDPPTVER), полученных из гидролизата белка молочной сыворотки верблюда Р-4.3 (оценка 0,8) (таблица 2) в попытке найти его наиболее вероятные макромолекулярные белковые мишени. Для этого мы инициировали это с помощью ряда поисковых систем в Интернете. Первым используемым механизмом был сервер SwissTargetPrediction, на котором он предсказывает биоактивность на основе поиска сходства в 2D / 3D для 370 тыс. Активных соединений, охватывающих более 3 тыс. Макромолекулярных белковых мишеней. Кроме того, поисковая система MolTarPred использовалась для сканирования более 600 тыс. Активных соединений и более 4,5 тыс. Макромолекулярных мишеней, в то время как сервер PASS использовался для сканирования более 260 тыс. Соединений с известной биологической активностью, используя правила базы знаний об их взаимосвязи между структурой и активностью. .С другой стороны, карты сходства между целями были предсказаны с помощью поисковой системы SEA (подход ансамбля сходства), которая выдает свои результаты на основе химического сходства и биологической кластеризации. Результаты, полученные от этих сетевых поисковых систем, были дополнительно отфильтрованы на основе их наивысших оценок и вовлеченности онкогенных целей. Наконец, гипотезы вовлечения макромолекулярных мишеней были оценены на основании их первоначального биологического скрининга (то есть вестерн-блоттинга). Соответственно, для первоначального биологического скрининга было номинировано несколько биологических мишеней, но, тем не менее, одна мишень; PLK-1 Polo box domain был подтвержден и подтвержден биологическими данными.

Наиболее вероятные способы связывания пептидов в пределах Polo-подобной киназы 1 (PLK1) были исследованы путем выполнения расчетов молекулярного стыкования и использования сервера MDockPeP. Для пептида-1 (AHLEQVLLR) рассматривалась модель с самым высоким ITScorePeP (-160,441). Пептид-1 (AHLEQVLLR) продемонстрировал эффективную эффективность связывания с активным сайтом фермента (рис. 3а слева) и смог установить два взаимодействия водородных связей с соответствующими аминокислотными остатками Arg-516 и His-538 (рис.3а справа). С другой стороны, режим связывания пептида-2 (ALPNIDPPTVER) был оценен как более значительный с рассчитанным ITScorePeP, равным — 162,385. Способ связывания пептида-2 соответствовал способу связывания пептида-1 (рис. 3b слева), а пептид-2 был способен установить три взаимодействия водородной связи с активным сайтом Tyr-417, Tyr-485 и Arg-516. остатки (рис. 3б справа). Сильный профиль взаимодействия был обнаружен среди Polo-подобной киназы-1 (Plk1) как с пептидом 1, так и с пептидом 2 (рис. 3a, b).

Фигура 3

Исследованные способы связывания пептидов в активном сайте домена поло-бокса PLK-1 (PDB-ID: 3RQ7).( a ) Режим связывания пептида-1 (AHLEQVLLR) из CWPH P-4.3 в активном сайте PLK-1, ( b ) Режим связывания пептида-2 (ALPNIDPPTVER) из CWPH P-4.3 в пределах активного площадка ПЛК-1. Левые панели проиллюстрировали общий сайт связывания, а правые панели проиллюстрировали взаимодействия водородных связей с остатками активного сайта. Лиганды и важные аминокислотные остатки представлены в виде карандашей, в то время как взаимодействия водородных связей показаны в виде зеленых пунктирных линий с соответствующими расстояниями в ангстремах.

Эти результаты стыковочного анализа согласуются с нашим анализом in vitro, в котором экспрессия Plk1 имеет решающее значение для контроля фазы G2 / M клеточного цикла и сверхэкспрессируется во многих типах опухолей. В доклинических исследованиях ингибиторы Plk1 показали значительную повышающую регуляцию экспрессии митотического маркера p-гистона h4. PLK1-индуцированное фосфорилирование циклина B1 необходимо для образования комплекса Cdk1 / Cyclin B1, который, в свою очередь, инициирует митотический вход клетки ³⁴ .Существуют две предполагаемые модели, демонстрирующие активность киназы PLK1, опосредованную PBD. Наши данные предполагают модель «процессивного фосфорилирования» с учетом фосфорикации CDK1 ³⁵ . Взятые вместе, Plk1, по-видимому, играет основную роль в индукции антимитотических и проапоптотических эффектов, передаваемых in vitro биоактивными пептидами, полученными из верблюжьей сыворотки.

In silico взаимосвязь структурной активности (SAR) идентифицированных пептидов с поло-подобной киназой 1 (PLK1)

Взаимодействие активного сайта между PLK-1 (код PDB: 3RQ7) и биоактивными пептидами из CWPH (P-4.3 и P-5.2) были изучены с использованием PepSite 2. Человеческий белок Polo-Like Kinase 1 (PLK1) играет важную регулирующую роль в митозе и клеточной пролиферации посредством фосфорилирования различных субстратов. Было обнаружено, что PLK1 сверхэкспрессируется при различных раковых заболеваниях, таких как рак простаты и колоректальный рак ³⁶ . Поэтому потенциальные ингибиторы этого белка ищут для разработки новых противораковых препаратов. Ингибирование активности PLK1 посредством связывания фосфо-лиганда с доменом Polo Box (PBD) является потенциальной терапией рака, поскольку оно может предотвратить завершение клеточного цикла и вызвать апоптоз.Таким образом, изучается интригующий набор новых ингибиторов PLK1 на предмет их потенциальной ингибирующей активности против PLK1. Детальный структурный анализ PLK1 показал, что PBD важен для активности PLK1. Сообщалось, что Val415, Tyr417, Tyr421, Leu478, Tyr481, Phe482 и Tyr485 распознаются как скрытые связывающие карманы на поверхности PLK-1 PBD ³⁷ . Эти остатки регулируют распознавание субстрата, принимая открытые и закрытые конформации и связывая пептид с этими поверхностными остатками PBD, может происходить различение субстрата, таким образом подавляя сверхэкспрессию PLK1 в опухолевых клетках.В таблице 3 показано значение p в качестве меры силы связывания, реактивного остатка в пептидах и потенциальных сайтов связывания идентифицированных пептидов с PLK-1. Было предсказано, что большинство пептидов в гидролизатах P-4.3 и P-5.2 были способны связываться с 5-7 криптическими сайтами связывания (CBS) PLK1. Эти сайты связывания CBS по существу отражают противораковые свойства CWPH P-4.3.

Таблица 3 Значения p для пептида 2, реактивные остатки и потенциальные сайты связывания выбранных пептидов в активном сайте домена поло-бокса PLK-1 (PDB-ID: 3RQ7).

(PDF) Исследование гидролизата бычьей сыворотки для усиления его антигипертензивных и антибактериальных свойств

Aust. J. Basic & Appl. Sci., 4 (12): 5761-5767, 2010

Таблица 5: Антибактериальная активность гидролизата сыворотки

Образцы Микроорганизмы Концентрация мг / мл% ингибирования

Стандарт 1. S. aureus 0,003 50

— ————————————————— ————————————————— ————————————————— ————————

(Хлорамфеникол) 2.Иерсиния 0,007 50

Грибковая протеаза и папаин 1.S. aureus 20 35,5

гидролизованный распылительной сушкой

—————————————- ————————————————— ————————————————— ————————————-

коровья сыворотка 2. Йерсиния 20 Без ингибирования

Антибактериальный Активность гидролизата бычьей сыворотки:

Значение IC50 образца для антигипертензивной активности является минимальным для двойного ферментного гидролизата и

, поэтому этот образец выбран для определения антибактериальной активности.Культуры Staphylococcus aureus и

Yersinia из 104 номеров выращивают в агаре для инфузии мозга и сердца вместе с образцом известной концентрации

, а контроли используют дистиллированную воду вместо образца и сравнивают. Подавление в количестве

микроорганизмов рассчитано, и результаты представлены в таблице 5.

Как видно из таблицы 5, 35,5% Staphylococcus aureus ингибировались образцом с концентрацией 20 мг / мл

, и это высокий показатель по сравнению с используемый стандарт, который показывает 50% ингибирование при 0.003 мг / мл

концентрация. Нет ингибирования Yersinia даже при более высокой концентрации (20 мг / мл) образца, но стандарт

показал 50% ингибирование 0,007 мг / мл.

Антигипертензивная активность:

Сыворотка, гидролизованная пепсином и трипсином, имеет 50% ингибирование при 0,42 мг / мл (Leppala, A.P. 1998).

Сывороточный белок, гидролизованный смесью поджелудочной железы, дал значение IC50 для ингибирования АПФ при 0,16-0,84

концентрации мг / мл (Ven.C.V.D 2002). Таким образом, из результатов нашего настоящего антигипертензивного исследования

ясно, что ингибирование АПФ и больше, когда мы используем протеазу грибов для гидролиза, то есть при 0,3 мг / мл, чем

папаин при 0,7 мг / мл. Также ингибирование АПФ эффективно с помощью двойного фермента, т.е. 0,24 мг / мл при более низкой концентрации

, чем образец, гидролизованный как папаином, так и протеазой грибов.

Антибактериальная активность:

Из текущего исследования видно, что их 35.5% ингибирование Staphylococcus aureus при концентрации двойного ферментного гидролизата в концентрации 20 мг / мл

, в то время как Yersinia pestis, которая является отрицательной по грамму

, не подавляется. В качестве нутрицевтического или дизайнерского питания образец (гидролизат сыворотки, приготовленный с двойным ферментом

) можно употреблять в пищу гораздо больше, чем эта концентрация 20 мг / мл, и, таким образом, он определенно будет иметь антибактериальную активность

по отношению к золотистому стафилококку, токсичному патогену, вызывающему пищевое отравление.Эта антибактериальная активность

может быть обусловлена ​​лактоферрином, лактопероксидазой, лизоцимом и иммуноглобулинами, которые присутствуют в сыворотке

(Hutches, T.W. 1994; Viljoen, M. 1995). Также лизоцим очень активен в подавлении грамположительных микроорганизмов

и нескольких грамотрицательных микроорганизмов, и, таким образом, золотистый стафилококк, который составляет

, подавляет до 35,5%, которые также являются грамположительными бактериями.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Батиш, В.К., Х. Чандер, К.Л. Зимдегни, Р.С. Bhatia, 1988. Aust.J.Dairy Technol, стр: 43: 16.

Blanca, H.L., A.P.J. Мартин и Э. Пуэйо, 2003. Оценка спектрофотометрического метода для определения

активности ангиотензинпревращающего фермента: влияние типа ингибирования. J.Agric.Food Chem.,

51: 4175-4179.

Клэр, Д.А. и он. Swaisgood, 2000. Биоактивные молочные пептиды: проспект. Journal of Dairy Science,

83: 1187–1195.

Дионисий, Д.А., П.А. Грайв и Дж. М. Милн. 1993. J.Daity Sci., 76: 2597.

Эдгар С., 2005. Технология молока и молочных продуктов. Marce Dekker Publ., Стр: 407-408.

Дженнесс Р., 1982 г. в Fox P.F. (Редактор), Разработки в химии молочных продуктов. 1, Proteins, Applied Science,

New York, pp: 87.

Hutchens, T.W., S.V. Рамбол и Б. Лоннердал, 1994. Лактоферрин: структура и функция. Adv. Expt.

Мед. Биол., 357: 1-298.

Leppala, A.P., 2001. Биоактивные пептиды, полученные из белков коровьей сыворотки: пептиды, ингибирующие опиод и ace

.